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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助关于发酵罐染菌
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limin19865

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-02-27 14:47:11
污染就那么几个途径，一个一个排除。
连续出现染菌现象，说明属于你的发酵系统存在问题。
染的什么菌，是前期还是后期描述不清楚，所以我也只能给个大概方向。
可能出现的问题：
1、种子带菌，这几率很小，几乎可以忽略不计，可以最后检查。
2、发酵罐有泡沫。
3、搅拌点泄漏。
4、发酵过程中负压。
5、原料中带菌，尤其是芽孢杆菌，比较难杀死，采用间歇灭菌。
6、降温系统渗漏。
7、空气过滤系统有问题，主要表现染菌为球菌。
等等，暂时就想到这么多。
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21楼2013-02-07 13:27:36
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an_na

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857: 金币+3, 新虫加油 2013-02-28 23:44:20
不通空气不染菌,证明是空气系统的问题，重消一下空气系统
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22楼2013-02-12 08:35:12
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xiaoyu680

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2013-02-28 23:44:25
可以先用稀氢氧化钠煮罐，然后清洗干净消毒做空白试验，如果不染菌，说明罐内可能有缺陷容易积聚杂菌，需要处理。如果还染，说明消毒过程可能有消不到的位置，消毒时注意检查蒸汽流通情况。另外注意一下消毒温度和保压时间，夹套的冷水是否排净等等。
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23楼2013-02-27 14:30:32
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erbaomama

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2013-02-28 23:44:30
24小时后染菌，用显微镜观察菌型，分析情况。可能：
1.培养基未消透。
2.无菌操作不规范，外界带入。
3.不论检测、试验是否染菌，正常接入种子运行试验，效价检测，看是否正常，配上镜检。
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24楼2013-02-28 16:03:44
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lanlong3000

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab: 金币+5, 谢谢交流 2013-03-05 13:21:29
不明原因的染菌非常头疼，而起不一定百分百找到问题所在，建议楼主先检查空气滤芯，确保滤芯没问题后给环境消毒和始终保持罐内正压比较实际，发酵罐一般很难保持整体密闭，都是靠正压气封，只要保证进罐的是合格的无菌空气就行。
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25楼2013-03-04 14:44:22
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dodge1984

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
scelab: 金币+3, 谢谢交流 2013-03-05 13:21:50
发酵染菌有很多不明原因让人头疼。
从楼主的描述来看，是不是培养基灭菌不彻底或者罐体有泄漏啊
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26楼2013-03-04 15:32:09
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jingg1990

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab: 金币+5, MicEPI+1, 谢谢交流 2013-03-05 13:22:20
首先看染菌菌型是否多变或是多个菌型，如果多变或是多个菌型，空气系统、渗漏、降温系统、补料系统、搅拌密封等多加检查，如果单一菌型，优先考虑罐内有死角，这个要从罐内的设施来判断，尤其是罐内有无设计或制作过程中产生的夹层或空心部分，也可以在罐内加满水，按实消操作加温煮沸，两小时后升温至126－128度，维持两个小时，关进排气阀闷罐，第二天重复操作，第三天放水后接着进培养基消毒空白培养，看是否染菌或染菌开始时间有无延长，即可判断是否死角的问题。
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27楼2013-03-05 13:19:47
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edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

在发酵过程中，应该一直保证罐子的正压啊。一般在0.03-0.05Mp，不知道lz有没有出现过负压的情况！
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28楼2013-05-24 11:01:06
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发酵流程卡

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1，接种过程中是否染菌；
2，接种或发酵过程中，发酵罐是否一直处于正压；
3，通入的是否为无菌空气。
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做最真实的自己
29楼2015-07-15 17:06:42
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