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请教同源重组的问题
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fenwuyi
金虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 531.1
帖子: 26
在线: 38.6小时
虫号: 1944563
注册: 2012-08-18
性别: GG
专业: 微生物遗传育种学
[
求助
]
请教同源重组的问题
我有两个重组片段在细菌表达,一个是抗性基因,另个是想要表达的基因,想要用重叠pcr 的方法将两个片段融合,问题是1)连接这两个片段是直接连接,(如抗性基因-终止子+启动子-基因),还是要在这两个片段间加些神马碱基。2)融合时的顺序有什么要求,同时都表达,表达后不需要敲除抗性基因
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1楼
2013-02-26 09:07:22
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铜虫
(初入文坛)
应助: 3
(幼儿园)
金币: 145.6
帖子: 24
在线: 55.7小时
虫号: 2239666
注册: 2013-01-14
性别: GG
专业: 病原细菌与放线菌生物学
【答案】应助回帖
中间不需要添加碱基。最好是先确定好你的启动子可以在宿主体内启动,然后按照你的那个顺序就应该没什么问题了,但如果整合的位置没有终止子,最好是在基因后面先加上一个。
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2楼
2013-03-04 15:59:54
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