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fenwuyi

金虫 (初入文坛)

[求助] 请教同源重组的问题

我有两个重组片段在细菌表达,一个是抗性基因,另个是想要表达的基因,想要用重叠pcr 的方法将两个片段融合,问题是1)连接这两个片段是直接连接,(如抗性基因-终止子+启动子-基因),还是要在这两个片段间加些神马碱基。2)融合时的顺序有什么要求,同时都表达,表达后不需要敲除抗性基因
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铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

中间不需要添加碱基。最好是先确定好你的启动子可以在宿主体内启动,然后按照你的那个顺序就应该没什么问题了,但如果整合的位置没有终止子,最好是在基因后面先加上一个。
2楼2013-03-04 15:59:54
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