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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】一个真菌同源重组的问题，纠结了好几天了
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九月的雨天

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】一个真菌同源重组的问题，纠结了好几天了

小弟前一段时间做了一个真菌的同源重组的实验
检测到目的抗性片段已经插入位点了
然后就把改造菌种-70保存了

悲剧的事情发生了。。。

过段时间拿出来做抗性检测发现抗性居然消失了
这是怎么一回事啊
有人说是回复突变了
这种小概率的事怎么就让我给碰上了呢

请教版里各位高人的见解
最好给小弟一点意见
谢过先
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1楼 2010-10-28 10:49:07
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geminiww

木虫 (职业作家)

猪家族~~哑巴猪
★
九月的雨天(金币+2):谢谢参与
怎么检测到的目的抗性片段已经插入位点了？
我觉得要是单纯做的抗性实验的话，有可能抗性基因没有接上，只是共同存在，保存后可能分离了，丢失了，毕竟回复突变几率不大啊。。
本科学过，见笑了~
赞一下(1人) 回复此楼
爱生活。。
2楼2010-10-28 11:08:40
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dashyi

铁杆木虫 (职业作家)

猪家族--共党猪
★
九月的雨天(金币+2):谢谢参与
来学习一下

[ Last edited by dashyi on 2010-10-28 at 11:10 ]
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珊瑚岛--军机使
3楼2010-10-28 11:09:30
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linwen9035

金虫 (小有名气)
★
九月的雨天(金币+2):谢谢参与
学习下！
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猪老板
4楼2010-10-28 11:40:36
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
九月的雨天(金币+2):谢谢参与
如何鉴定的插入

southern？
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5楼2010-10-28 11:48:31
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konglingqian
★
九月的雨天(金币+2):谢谢参与
dhd997:非灌水帖子，请尽量不要纯表交流。下次扣除金币！ 2010-10-28 12:02:57
6楼2010-10-28 11:58:17
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黑色风信子
★
九月的雨天(金币+2):谢谢参与
dhd997:非灌水帖子，请尽量不要纯表交流。下次扣除金币！ 2010-10-28 12:50:49
7楼2010-10-28 12:02:59
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jianwei8730

木虫 (著名写手)
★
九月的雨天(金币+2):谢谢参与
??
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悟，勤，敢，真
8楼2010-10-28 12:32:00
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wgf1115

木虫 (著名写手)
★
九月的雨天(金币+2):谢谢参与
抗性质粒保存了吗？可以重新转化下。菌种相对容易把外源物质丢失的。保存体系中含有抗性抗生素吧？
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9楼2010-10-28 12:59:53
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九月的雨天

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by geminiww at 2010-10-28 11:08:40:
怎么检测到的目的抗性片段已经插入位点了？
我觉得要是单纯做的抗性实验的话，有可能抗性基因没有接上，只是共同存在，保存后可能分离了，丢失了，毕竟回复突变几率不大啊。。
本科学过，见笑了~

对获得的抗性克隆进行了PCR，条带摆在那儿啊
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10楼2010-10-28 13:52:28
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