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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

BioEPI: 1
应助: 8 (幼儿园)
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红花: 3
帖子: 1344
在线: 419.7小时
虫号: 569374
注册: 2008-06-05
专业: 抗肿瘤药物药理

[求助] western问题求救！！！

western转膜后，100V,1h20min，转膜时，温度很高，听见周围的冰融化的声音，电流一开始就300mA，最后貌似升到1000多mA，也不知道是哪里出错了导致这么发热，转膜液最后变成黄色（见图），胶也变黄了，但膜上的marker很明显（见图），我用TBST洗了膜2次，每次5min，听说蛋白在高温下会降解，请问还有做下去的必要吗？那么出现这个是什么原因？

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1楼 2013-02-04 09:34:51

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晴天1882

木虫 (正式写手)

应助: 19 (小学生)
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沙发: 1
帖子: 647
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注册: 2009-04-09
性别: MM
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-02-06 07:35:40

好恐怖啊！从没遇到这种情况，我电流最大也就250ma，两个半小时，转170KD左右的蛋白，你是多大的蛋白？怎么那么大电流，对仪器也不好啊！感觉都要短路了似的，温度这么高，大蛋白或许真的降解了。

人有绝交，才有至交！

6楼2013-02-05 23:45:30

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