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任天青

金虫 (小有名气)

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[求助] 蛋白样品解冻后沉淀

各位虫子，我的蛋白样品透析除盐后加了20%甘油，一直保存在-80度冷藏，今天取出来4℃解冻后，立即10,000g离心发现产生不少沉淀（要过柱，除沉淀）。
这是什么原因造成的？莫不是需要恢复道室温让它溶解一段时间吧？该怎么解决？各位同仁请帮忙解答一下。非常感谢！

[ Last edited by 任天青 on 2013-1-19 at 23:55 ]

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实验虐我千百遍，我待实验如初恋...

1楼 2013-01-19 23:53:36

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flll2014

铜虫 (小有名气)

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引用回帖:

5楼: Originally posted by gelois at 2013-01-21 16:58:29
你的蛋白不稳定吧，冻存之前最好加甘油，DTT之类的，还有冻存的时候也最好稍微提高点盐浓度，这样蛋白比较稳定。

而且解冻的时候，我们实验室之前是用冰水浴解冻的。不过现在37度水浴，快速解冻，这样比冰水浴解 ...

你再37度中解冻会会出现沉淀吗，我在冰水浴中解冻也就半个小时左右，出现了好多沉淀，我的蛋白原先是冻在-80度冰箱的，都不知道沉淀是什么，还能不能用