应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白样品解冻后沉淀
81/1返回列表
查看: 3623  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

任天青

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白样品解冻后沉淀

各位虫子，我的蛋白样品透析除盐后加了20%甘油，一直保存在-80度冷藏，今天取出来4℃解冻后，立即10,000g离心发现产生不少沉淀（要过柱，除沉淀）。
这是什么原因造成的？莫不是需要恢复道室温让它溶解一段时间吧？该怎么解决？各位同仁请帮忙解答一下。非常感谢！

[ Last edited by 任天青 on 2013-1-19 at 23:55 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
实验虐我千百遍，我待实验如初恋...
1楼 2013-01-19 23:53:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lester11

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
得具体看蛋白的稳定性以及储存条件，解冻最好在正常的储存温度
赞一下 回复此楼
Followyourheart!
2楼2013-01-20 00:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
像这种不稳定的蛋白，你在冷冻之前要加上还原剂的比如DTT，TCEP-HCL。而且溶解时候是要在冰水浴中溶解。
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-21 11:03:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Allen206

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
沉淀是正常的啊，相互碰撞聚集啊，有效的稳定剂我不知道哪些好用，只有离心然后上柱子了
赞一下 回复此楼
不想说什么，，，，
4楼2013-01-21 12:13:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-01-22 12:11:22
你的蛋白不稳定吧，冻存之前最好加甘油，DTT之类的，还有冻存的时候也最好稍微提高点盐浓度，这样蛋白比较稳定。

而且解冻的时候，我们实验室之前是用冰水浴解冻的。不过现在37度水浴，快速解冻，这样比冰水浴解冻，蛋白要稳定的多。因为蛋白解冻过程短了，对它的损伤要小一点。
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-21 16:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Lester11 at 2013-01-20 00:19:58
得具体看蛋白的稳定性以及储存条件，解冻最好在正常的储存温度

请问怎么查到蛋白质的正常储存温度
赞一下 回复此楼
6楼2014-09-04 10:25:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flll2014

铜虫 (小有名气)
我也遇到这种情况，不知道沉淀还能不能要，我的是没脱盐的，在冰中溶解后就有沉淀，但是晃一晃就没有了，离心后就什么都看不到了。
赞一下 回复此楼
7楼2014-09-04 11:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gelois at 2013-01-21 16:58:29
你的蛋白不稳定吧，冻存之前最好加甘油，DTT之类的，还有冻存的时候也最好稍微提高点盐浓度，这样蛋白比较稳定。

而且解冻的时候，我们实验室之前是用冰水浴解冻的。不过现在37度水浴，快速解冻，这样比冰水浴解 ...

你再37度中解冻会会出现沉淀吗，我在冰水浴中解冻也就半个小时左右，出现了好多沉淀，我的蛋白原先是冻在-80度冰箱的，都不知道沉淀是什么，还能不能用
赞一下 回复此楼
8楼2014-09-06 11:05:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 任天青 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 化学调剂0703 +7 啊我我的 2026-03-11 7/350 2026-03-15 23:03 by 凌千颂111
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +3 归零lbm 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:20 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 304求调剂（085602一志愿985） +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭