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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 确定连接时载体，片段的加入量
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周志惠

新虫 (小有名气)

[求助] 确定连接时载体，片段的加入量

请各位帮忙确定一下连接体系，载体和片段的加入量，电泳图如下，载体是5.7kb,片段是2kb,T4连接酶，16℃
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    • 2013-01-15 09:26:14, 4.9 M

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1楼 2013-01-15 09:32:35
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周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-15 09:58:27
用的什么marker，上样量多少？目的片段和载体片段各上了几微升？此外，你的目的片段明显上样量太大，从胶上很难估算浓度。你可以用软件对比marker分析浓度。最好条带的亮度与分子量相当的marker条带接近。

Marker是λ-EcoT14Ⅰdigest  DNA Marker，上样量是5μL，目的片段和载体上样量是1μL
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4楼2013-01-15 14:36:27
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