第一次接触，自己也看了很多资料，依然有点糊涂，希望各位能人予以指点啊~在此先谢过了！
目的：看一个基因在胁迫条件下表达量的变化。
实验样本：一株植物胁迫0,1,2,3,4,5,6h后取材
已选定目的基因和内参基因，Tm值和产物长度类似
疑问：1、在确定目的基因和内参基因扩增效率是否一致时，每个时期的样本均需要做，还是只选择一个时期的做就可以？
2、在设置稀释梯度时，同一梯度的样本副本，是采用同一时期不同花朵所提RNA，还是同一花朵所提RNA的分装？
3、扩增效率是不是来筛选最佳的反应条件的，只要是筛选到合适的，正式试验的时候就不需要稀释成各个梯度来做，直接以各个处理时期的样本来扩增内参、目的基因就可以了~？
谢谢~ |
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