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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌总蛋白提取
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lijingyuyan

银虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌总蛋白提取

我想要用超声的方法提大肠杆菌总蛋白，其中加有溶菌酶，我看文献上说在超声破碎之后要度振摇1小时，想要知道四度振摇的作用是什么？另外，如果用丙酮沉淀法除盐的话，怎么溶解总蛋白并保证蛋白中没有盐？
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有容乃大
1楼 2013-01-07 19:25:38
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gongzifan812

新虫 (初入文坛)
★
zhangxingc: 金币+1, 鼓励应助 2013-02-19 09:37:04
国内应该好多试剂公司有试剂盒吧，大肠的蛋白还真没做过，原来见人用过超声破碎，具体里面用了什么就不知道了
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4楼2013-02-19 00:06:09
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2013-01-07 22:44:48
lijingyuyan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-08 08:22:56
振荡的作用应该是在于方便蛋白的溶出，提高蛋白收率，低温维持蛋白的活性。丙酮沉淀两次应该就能很好的除盐，这个没动手做过，不是很清楚。
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2楼2013-01-07 22:21:55
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lijingyuyan

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2013-01-07 22:21:55
振荡的作用应该是在于方便蛋白的溶出，提高蛋白收率，低温维持蛋白的活性。丙酮沉淀两次应该就能很好的除盐，这个没动手做过，不是很清楚。

谢谢laozuzunzhe的回复，但是用丙酮沉淀后的蛋白用纯水似乎是无法溶解，加Urea的话是可以溶解，但是这样又会把Urea引入其中，还是需要除盐。
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有容乃大
3楼2013-01-08 08:22:28
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