| 查看: 1893 | 回复: 26 | |||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||||
[交流]
融合表达蛋白酶的表达
|
|||||
| 大家好 我现在在研究融合肽的性质 由于研究的抗菌肽太小 导师让我在它前面连接了表皮生长因子基因 表皮生长因子和抗菌肽之间连接凝血酶识别位点基因（因为考虑肠激酶切割效率问题 不打算用肠激酶） 现在的问题是要在表皮生长因子前面加一个既不会产生多余残基切割效率又高的蛋白酶序列 目的是表达后切掉his标签 查了资料感觉可以用TEV蛋白酶 但是切割后会有一个gly残基 如果以后要做药物开发就会有影响 有没有虫友对这方面比较了解 希望给出宝贵意见 感激不尽 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 | 蛋白质生物学 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有212人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 枯草芽孢杆菌基因敲除后的回补实验
已经有16人回复
- 如何在蛋白纯化后去除6组氨酸(6His)标签
已经有17人回复
- 蛋白互作必会，GST纯化遇到的问题
已经有13人回复
- 蛋白酶基因表达，用的Bacillus subtilis系统，但总是表达不出，求高人指点……
已经有19人回复
- 蛋白降解的问题
已经有11人回复
- gst标签，蛋白纯化
已经有25人回复
- 原核表达标签的切除，及信号肽的影响
已经有5人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带
已经有41人回复
- 【求助/交流】蛋白酶去信号肽可以正常表达吗？和表达载体有关吗？
已经有3人回复
- 【求助/交流】蛋白酶在大肠杆菌表达在牛奶平板上有透明圈，液体诱导却无酶活
已经有5人回复
- 求助翻译【糖化酶】英文文献一篇
已经有12人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌表达系统蛋白酶对目的蛋白的水解问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】谁知道如何去除GST标签啊，帮帮忙啊，急！
已经有4人回复
- 如何设计实验检测蛋白酶的分泌途径
已经有2人回复
- 【求助/交流】MBP融合蛋白活性低？
已经有10人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
中国科学院杭州医学研究-常皓研究员课题组博士后招聘
+1/283
-
化学化工学院 招收化工、化学、材料等相关方向研究生（学硕、专硕都有调剂名额）
+1/85
-
散金币，求好运，祝面上顺利！
+2/74
-
招收2026年材料与化工专硕调剂，全国重点实验室，过国家线即可调剂，名额充足
+2/72
-
加拿大阿尔伯塔大学招收电磁、无线通信、机器学习方向全奖硕士/博士/博士后/访问学者
+1/53
-
飘在美国，有点想家
+1/53
-
欢迎交流咨询
+1/47
-
吲哚美辛原料药合成交流
+1/38
-
0854电子信息调剂，闽南师大光电芯片研发实验室
+1/35
-
从专科一路到211硕士，到TOP5博士，也想进高校体制
+1/33
-
华南师范大学（211）申请审核制博士招生- 电子、自动化、机械、生物学、物理相关专业
+1/24
-
北京某研究院生物化学与分子生物学相关专业申请考核制博士招生（春季）
+1/12
-
青岛科技大学化工学院院士团队2026年拟招收全日制博士研究生1名
+1/11
-
南昌航空大学代威力教授招收光催化和光热催化研究方向博士生
+1/9
-
欢迎生物与医药、药学、化学等相关专业的同学
+1/7
-
华中科技大学管理学院招聘社会用工（科研助理）1名
+1/6
-
国家级人才团队诚聘生物信息相关专业的科研助理
+1/5
-
北京农学院生物工程学硕名额2个，生物、农学、食品、环境等专业均可申请调剂！
+2/2
-
南昌航空大学拟招收飞行器设计或计算流体力学研究方向博士生 1名
+1/2
-
首次招收资格，招收工科调剂！
+1/1
11楼2012-12-31 21:44:27
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
yiye1220(金币+1): 谢谢参与
amisking: 金币+4, MolEPI+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2012-12-31 22:25:11
yiye1220: 金币+3 2013-01-01 13:23:20
yiye1220(金币+1): 谢谢参与
amisking: 金币+4, MolEPI+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2012-12-31 22:25:11
yiye1220: 金币+3 2013-01-01 13:23:20
|
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2771223 http://wenku.baidu.com/view/58b176a4f524ccbff12184ae.html http://wenku.baidu.com/view/484ad0d484254b35eefd344c.html http://wenku.baidu.com/view/a892093767ec102de2bd89d5.html http://wenku.baidu.com/view/9a0f0b3083c4bb4cf7ecd1a0.html http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-SPKX200919054.htm http://www.haodf.com/zhuanjiaguandian/liuhaitaodoctor_111177.htm http://www.doc88.com/p-676169837475.html 基质金属蛋白酶是一个大家族，因其需要Ca++、Zn++等金属离子作为辅助因子而得名，其家族成员具有相似的结构，一般由5个功能不同的结构域组成 :（1）疏水信号肽序列;（2）前肽区，主要作用是保持酶原的稳定。当该区域被外源性酶切断后，MMPs酶原被激活;（3）催化活性区，有锌离子结合位点，对酶催化作用的发挥至关重要;（4）富含脯氨酸的铰链区;（5）羧基末端区，与酶的底物特异性有关。其中酶催化活性区和前肽区具有高度保守性。MMPs成员上述结构的基础上各有特点。各种MMP间具有一定的底物特异性，但不是绝对的。同一种MMP可降解多种细胞外基质成份，而某一种细胞外基质成分又可被多种MMP降解，但不同酶的降解效率可不同。 MMPs几乎能降解ECM中的各种蛋白成分,破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障，在肿瘤侵袭转移中起关键性作用，从而在肿瘤浸润转移中的作用日益受到重视，被认为是该过程中主要的蛋白水解酶。目前MMPs家族已分离鉴别出26个成员，编号分别为MMP1～26。根据作用底物以及片断同源性，将MMPs分为4类。 Ⅳ型胶原酶为其中重要的一类，它主要有两种形式，一种被糖化，分子量为92kD，命名为MMP-9;另一种非糖化，分子量为72kD，被称为MMP-2。当前对MMP-2，MMP-9的研究较深入。 MMP-2基因位于人类染色体16q21，由13个外显子和12个内含子所组成，结构基因总长度为27kb，与其他金属蛋白酶不同，MMP-2基因5’旁侧序列促进子区域含有2个GC盒而不是TATA盒。活化的MMP-2定位于细胞穿透基质的突出部位，估计其在酶解细胞间基质成分及基底膜的主要成分Ⅳ型胶原中有“钻头”的作用。 此外，已证实MMP-3 和MMP-10能作用于PG、LN、FN、Ⅲ型和Ⅳ型胶原及明胶。MMP-7能作用于明胶和FN。MMP-1的产生范围较广，可由基质纤维母细胞、巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞产生。正常情况下MMP-1阳性率很低，但在各种刺激下可高表达。有研究显示恶性肿瘤中MMP-1高表达与预后相关。 MMPs的活性受到三个水平的调节，即基因转录水平，无活性酶前体经蛋白水解作用而激活以及特异性抑制因子（TIMP）的作用。 |
5楼2012-12-31 18:55:04
★ ★ ★ ★
yiye1220(金币+1): 谢谢参与
yiye1220: 金币+3 2013-01-01 13:23:34
yiye1220(金币+1): 谢谢参与
yiye1220: 金币+3 2013-01-01 13:23:34
|
本帖内容被屏蔽 |
7楼2012-12-31 19:31:48
12楼2012-12-31 21:45:51
