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关于PCR,跑胶,求分析胶片
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fanwq258
木虫
(正式写手)
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(小学生)
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帖子: 686
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虫号: 1694785
[交流]
关于PCR,跑胶,求分析胶片
这是这几天跑得胶,为什么一直有拖尾似的东西。而且以前可以跑出来的引物也有那样的拖尾似的东西,并且挺多的。求解惑啊!求指点啊!
Administrator 2012-12-27 22hr 49min.jpg
Administrator 2012-12-29 16hr 14min.jpg
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2012-12-30 21:51:34
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fdzkfdzk1
新虫
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2013-01-02 17:12:35
fanwq258: 金币+1
2013-01-02 17:35:15
最近我做了核酸提取纯化然后反转录得到的cDNA,跑胶后点样孔周围并没有出现如上的亮斑。1.分析RNA质量,看是否有蛋白污染;2. 分析PCR模板,是否有降解;3. PCR体系进行分析,适当降低dNTP和Mg2+的浓度;4. 适当降低PCR循环。
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36楼
2013-01-02 16:12:18
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sj_wu
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fanwq258: 金币+1
2013-01-01 13:05:24
还算正常,只是没有主带,拖尾是其他能被EB染色的杂质,如蛋白、酶以及其他分子
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2楼
2012-12-30 21:57:56
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fanwq258
木虫
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2楼
:
Originally posted by
sj_wu
at 2012-12-30 21:57:56
还算正常,只是没有主带,拖尾是其他能被EB染色的杂质,如蛋白、酶以及其他分子
,但是为什么每次都有拖尾呢?
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3楼
2012-12-30 22:17:50
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cicelyzh
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fanwq258: 金币+1
2013-01-01 13:05:44
跑的是什么?PCR产物吗?感觉是样品不干净。marker不拖说明是样品问题。还有,你的胶的点样孔怎么那么亮啊。
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4楼
2012-12-31 06:18:46
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