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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 跑胶有条带，测序无结果？？
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Alex0325

主管区长 (文学泰斗)

噢，不是烟鬼丶

文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献文献杰出贡献

[求助] 跑胶有条带，测序无结果？？

RT，貌似是200-300bp吧，大家知道什么原因吗？？？？？
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身体健康，心情愉悦，简单幸福！
1楼 2012-12-15 11:57:08
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lyqifeih

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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Alex0325: 金币+2, ★有帮助 2012-12-15 12:28:22
这个问题， 经常碰到，问题比较多，可能是DNA纯化的时候浓度不够，我就是做测序的。 推荐转质粒，测序！ 这样就没有问题！！
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刚进入神经生物和电生理
2楼2012-12-15 12:16:18
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Alex0325

主管区长 (文学泰斗)

噢，不是烟鬼丶

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引用回帖:
2楼: Originally posted by lyqifeih at 2012-12-15 12:16:18
这个问题， 经常碰到，问题比较多，可能是DNA纯化的时候浓度不够，我就是做测序的。 推荐转质粒，测序！ 这样就没有问题！！

您是说设计酶切位点插入到质粒啊？
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身体健康，心情愉悦，简单幸福！
3楼2012-12-15 12:18:26
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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Alex0325: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-12-15 12:31:47
可以做个TA克隆，然后测序比较保险。
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4楼2012-12-15 12:23:50
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Alex0325: 金币+2, ★有帮助 2012-12-15 12:28:40
可能是胶回收效果不好，或者是引物不好，最保险的方法，还是连T载体测序吧，这样的结果相对来说是比较准，一般不会出现问题
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5楼2012-12-15 12:23:50
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Alex0325

主管区长 (文学泰斗)

噢，不是烟鬼丶

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引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-15 12:23:50
可以做个TA克隆，然后测序比较保险。

TA克隆是什么？？呵呵。。。
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6楼2012-12-15 12:25:12
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Alex0325

主管区长 (文学泰斗)

噢，不是烟鬼丶

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引用回帖:
5楼: Originally posted by 追梦的人1987 at 2012-12-15 12:23:50
可能是胶回收效果不好，或者是引物不好，最保险的方法，还是连T载体测序吧，这样的结果相对来说是比较准，一般不会出现问题

这个是我培养在国外做的。。叫单细胞PCR，然后测序什么的是由专门负责的。现在就是说每次跑胶都有条带，但是测序就是测不出来。。。。
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身体健康，心情愉悦，简单幸福！
7楼2012-12-15 12:26:50
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lyqifeih

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

就是连接到T载体里，然后摇菌！
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刚进入神经生物和电生理
8楼2012-12-15 12:26:56
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Alex0325 at 2012-12-15 12:26:50
这个是我培养在国外做的。。叫单细胞PCR，然后测序什么的是由专门负责的。现在就是说每次跑胶都有条带，但是测序就是测不出来。。。。...

那就连T载体吧，应该很简单的，是分子学方面的基本操作
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9楼2012-12-15 12:28:20
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Alex0325

主管区长 (文学泰斗)

噢，不是烟鬼丶

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引用回帖:
9楼: Originally posted by 追梦的人1987 at 2012-12-15 12:28:20
那就连T载体吧，应该很简单的，是分子学方面的基本操作...

好吧，估计是直接测的，因为他们送去就能测，应该不是连接后测的。我告诉一下吧。。
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身体健康，心情愉悦，简单幸福！
10楼2012-12-15 12:30:19
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