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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DGGE相关问题
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月下白狼

新虫 (小有名气)

[求助] DGGE相关问题

我最近在做DGGE  想问下，高浓度胶中加的染色液是什么啊？能不能是实验室中比较常见的染液？能用肉眼看出浓度变化是否均一不就OK了吗。。。
还有就是跑完胶后怎么才能知道哪个条带能切呢？难道当时就要用软件分析出来吗？
再次跪求了，这是我全部的悬赏了。。望好心人解答！！好人一生平安！！因为实验室没有人会，一直都靠自己摸索
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1楼 2012-12-06 22:53:07
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fei709373487

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
拍完照后，根据图片，选择一些特异性的条带切就行了
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2楼2012-12-07 09:33:06
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fei709373487

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-07 16:31:10
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5楼: Originally posted by 月下白狼 at 2012-12-07 11:31:13
前辈。。那不用当时就用软件分析条带然后根据软件提示来切吗？我是不太懂啊，没做过。还有灌胶时把胶染色那个用什么染啊？...

呵呵，我也不是前辈啦，不过也才做了几个月，也是问题一大堆。但是你这个如果之前出过图的话可以先分析一下，然后有目的的切胶，如果之前没有图就只能是根据条带先肉眼找特异性条带来切了，当然你如果用银染的话可以先分析下的，如果用SYB GREEN染的话，等拍完照分析完胶估计也坏掉了
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7楼2012-12-07 12:43:07
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fei709373487

新虫 (初入文坛)
各位大侠，也帮忙看一下，我已经两次出现这种情况了，不知道做胶的过程中哪里出了问题，同样的操作之前就挺好的，时间紧迫，急啊！！

IMG_20121207_082955.jpg
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3楼2012-12-07 10:54:45
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月下白狼

新虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by fei709373487 at 2012-12-07 10:54:45
各位大侠，也帮忙看一下，我已经两次出现这种情况了，不知道做胶的过程中哪里出了问题，同样的操作之前就挺好的，时间紧迫，急啊！！

IMG_20121207_082955.jpg
...

据我浅见，应该是胶不匀吧。。。灌胶的时候把胶染个色看看，我也不知道拿什么染
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4楼2012-12-07 11:28:53
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月下白狼

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by fei709373487 at 2012-12-07 09:33:06
拍完照后，根据图片，选择一些特异性的条带切就行了

前辈。。那不用当时就用软件分析条带然后根据软件提示来切吗？我是不太懂啊，没做过。还有灌胶时把胶染色那个用什么染啊？
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5楼2012-12-07 11:31:13
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fei709373487

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 月下白狼 at 2012-12-07 11:28:53
据我浅见，应该是胶不匀吧。。。灌胶的时候把胶染个色看看，我也不知道拿什么染...

谢谢！的确是胶不匀，应该是中间浓度比较高，但是不知道怎么会这样
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6楼2012-12-07 12:39:24
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月下白狼

新虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by fei709373487 at 2012-12-07 12:43:07
呵呵，我也不是前辈啦，不过也才做了几个月，也是问题一大堆。但是你这个如果之前出过图的话可以先分析一下，然后有目的的切胶，如果之前没有图就只能是根据条带先肉眼找特异性条带来切了，当然你如果用银染的话可 ...

谢谢你的回答！
还有个问题就是y型管灌胶时，玻璃夹板一侧的y型管是连着针头吗? 那需要多大号的针头呢？还是能用别的东西代替一下？
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8楼2012-12-07 16:56:51
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fei709373487

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
月下白狼: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-08 23:01:04
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8楼: Originally posted by 月下白狼 at 2012-12-07 16:56:51
谢谢你的回答！
还有个问题就是y型管灌胶时，玻璃夹板一侧的y型管是连着针头吗? 那需要多大号的针头呢？还是能用别的东西代替一下？...

是连着针头的，只要管子能刚好插上针头就是可以的，我就是既有大点的针头也有小的，至于别的东西代替嘛，我想不到更好的东西啦
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9楼2012-12-07 18:47:03
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月下白狼

新虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by fei709373487 at 2012-12-07 18:47:03
是连着针头的，只要管子能刚好插上针头就是可以的，我就是既有大点的针头也有小的，至于别的东西代替嘛，我想不到更好的东西啦...

前辈，这是我今天费了九牛二虎之力做的一个DGGE。不知道这是怎么个情况，为什么条带和条带都连着，不像文献那种很整齐，再说这条带太少了吧。。。

IMG_0863.JPG
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10楼2012-12-08 20:31:31
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