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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 最近跑了几个DGGE，出现一些问题，请教大家
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heqin-1985

银虫 (小有名气)

[求助] 最近跑了几个DGGE，出现一些问题，请教大家

最近刚学会的DGGE，有一下几个问题：为什么出现灰白间隔的背景呢，还有图片上有很多脏东西，这两天跑的都有，有一张图中的条带有重影，不清晰，和我一起跑的同学就没有这样的情况。请教一下大家，谢谢！
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heqin-1985

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1楼2012-01-08 12:38:53
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回帖置顶 ( 共有1个 )

在雨中

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小丹木木(金币+1): 很有用哦 2012-01-10 09:42:57
西瓜(金币+4, MolEPI+1): 热心虫虫~ 2012-02-07 11:40:13
引用回帖:
6楼: Originally posted by heqin-1985 at 2012-01-10 00:26:07:
还有请教光圈太大什么意思啊，该怎么调呢，用的是D-Code universal mutation detection system (Bio-Rad, Hercules, CA)拍的图像

通俗点讲。你的曝光时间太长了。哈哈。拍照的时候，把你的曝光强度调最大（右边按板最上面的并排按键最大化），适当降低曝光时间，比如2-5s，不要曝光个10-20s的。
DGGE电泳的时候，最边上的1-2个泳道是有完全的，因为，可能跟配胶的时候，边上的表面张力导致梯度不是平行的有关，也有人认为点点漏胶导致。不管怎么样，解决的办法是，如果你有15个样品，就不要用16孔的梳子，用20个孔的梳子。同样，如果你有20个样品，就可以使用25孔的梳子，而坚决不要使用20孔梳子。呵呵。
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9楼2012-01-10 09:15:23
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s2006204023

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
heqin-1985(金币+1): 2012-01-08 19:47:16
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-08 21:14:33
玻璃板没洗干净，或者，染色时候的平皿不干净
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既然选择了远方，便只顾风雨兼程！
2楼2012-01-08 13:04:37
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在雨中

金虫 (著名写手)
★
小丹木木(金币+1): 我也这么觉得，楼主正解 2012-01-09 09:46:54
第一张图有黑白道是因为你曝光时间太长了，或者光圈太大。使用的凝胶成像系统吧？
后面俩图挺好看的。如果有点脏，可能是你染色的时候沾上的，跟胶没关系。
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3楼2012-01-09 09:43:44
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heqin-1985

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 在雨中 at 2012-01-09 09:43:44:
第一张图有黑白道是因为你曝光时间太长了，或者光圈太大。使用的凝胶成像系统吧？
后面俩图挺好看的。如果有点脏，可能是你染色的时候沾上的，跟胶没关系。

是的，觉得中间的图有点糊糊的，不知道怎么回事
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4楼2012-01-10 00:17:22
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heqin-1985

银虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 在雨中 at 2012-01-09 09:43:44:
第一张图有黑白道是因为你曝光时间太长了，或者光圈太大。使用的凝胶成像系统吧？
后面俩图挺好看的。如果有点脏，可能是你染色的时候沾上的，跟胶没关系。

最后一张图的左边也是歪的，请教这是为什么呀，这个现象时有时无
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5楼2012-01-10 00:18:25
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heqin-1985

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
还有请教光圈太大什么意思啊，该怎么调呢，用的是D-Code universal mutation detection system (Bio-Rad, Hercules, CA)拍的图像
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6楼2012-01-10 00:26:07
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2012-02-07 11:39:26
引用回帖:
5楼: Originally posted by heqin-1985 at 2012-01-10 00:18:25:
最后一张图的左边也是歪的，请教这是为什么呀，这个现象时有时无

琼脂糖凝胶电泳的时候会出现边缘效应，就是边上的泳道容易出现问题，不知道你的这个是不是也是这种现象
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7楼2012-01-10 08:55:58
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在雨中

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by heqin-1985 at 2012-01-10 00:17:22:
是的，觉得中间的图有点糊糊的，不知道怎么回事

你可以调整下凝胶成像系统右边按板上的按钮，zoom可以调整视野大小，irs可以调节清晰度，这个时候你如果觉得模糊，可以尝试下调大调小irs键。
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8楼2012-01-10 09:11:52
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heqin-1985

银虫 (小有名气)
谢谢大家，实验里再试试
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10楼2012-01-10 23:35:26
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