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heqin-1985

银虫 (小有名气)

[求助] 最近跑了几个DGGE,出现一些问题,请教大家

最近刚学会的DGGE,有一下几个问题:为什么出现灰白间隔的背景呢,还有图片上有很多脏东西,这两天跑的都有,有一张图中的条带有重影,不清晰,和我一起跑的同学就没有这样的情况。请教一下大家,谢谢!






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s2006204023

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
heqin-1985(金币+1): 2012-01-08 19:47:16
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-08 21:14:33
玻璃板没洗干净,或者,染色时候的平皿不干净
既然选择了远方,便只顾风雨兼程!
2楼2012-01-08 13:04:37
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在雨中

金虫 (著名写手)



小丹木木(金币+1): 我也这么觉得,楼主正解 2012-01-09 09:46:54
第一张图有黑白道是因为你曝光时间太长了,或者光圈太大。使用的凝胶成像系统吧?
后面俩图挺好看的。如果有点脏,可能是你染色的时候沾上的,跟胶没关系。
3楼2012-01-09 09:43:44
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heqin-1985

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 在雨中 at 2012-01-09 09:43:44:
第一张图有黑白道是因为你曝光时间太长了,或者光圈太大。使用的凝胶成像系统吧?
后面俩图挺好看的。如果有点脏,可能是你染色的时候沾上的,跟胶没关系。

是的,觉得中间的图有点糊糊的,不知道怎么回事
4楼2012-01-10 00:17:22
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heqin-1985

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 在雨中 at 2012-01-09 09:43:44:
第一张图有黑白道是因为你曝光时间太长了,或者光圈太大。使用的凝胶成像系统吧?
后面俩图挺好看的。如果有点脏,可能是你染色的时候沾上的,跟胶没关系。

最后一张图的左边也是歪的,请教这是为什么呀,这个现象时有时无
5楼2012-01-10 00:18:25
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heqin-1985

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
还有请教光圈太大什么意思啊,该怎么调呢,用的是D-Code universal mutation detection system (Bio-Rad, Hercules, CA)拍的图像
6楼2012-01-10 00:26:07
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)


西瓜(金币+1): 鼓励交流 2012-02-07 11:39:26
引用回帖:
5楼: Originally posted by heqin-1985 at 2012-01-10 00:18:25:
最后一张图的左边也是歪的,请教这是为什么呀,这个现象时有时无

琼脂糖凝胶电泳的时候会出现边缘效应,就是边上的泳道容易出现问题,不知道你的这个是不是也是这种现象
7楼2012-01-10 08:55:58
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在雨中

金虫 (著名写手)


引用回帖:
4楼: Originally posted by heqin-1985 at 2012-01-10 00:17:22:
是的,觉得中间的图有点糊糊的,不知道怎么回事

你可以调整下凝胶成像系统右边按板上的按钮,zoom可以调整视野大小,irs可以调节清晰度,这个时候你如果觉得模糊,可以尝试下调大调小irs键。
8楼2012-01-10 09:11:52
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在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小丹木木(金币+1): 很有用哦 2012-01-10 09:42:57
西瓜(金币+4, MolEPI+1): 热心虫虫~ 2012-02-07 11:40:13
引用回帖:
6楼: Originally posted by heqin-1985 at 2012-01-10 00:26:07:
还有请教光圈太大什么意思啊,该怎么调呢,用的是D-Code universal mutation detection system (Bio-Rad, Hercules, CA)拍的图像

通俗点讲。你的曝光时间太长了。哈哈。拍照的时候,把你的曝光强度调最大(右边按板最上面的并排按键最大化),适当降低曝光时间,比如2-5s,不要曝光个10-20s的。
DGGE电泳的时候,最边上的1-2个泳道是有完全的,因为,可能跟配胶的时候,边上的表面张力导致梯度不是平行的有关,也有人认为点点漏胶导致。不管怎么样,解决的办法是,如果你有15个样品,就不要用16孔的梳子,用20个孔的梳子。同样,如果你有20个样品,就可以使用25孔的梳子,而坚决不要使用20孔梳子。呵呵。
9楼2012-01-10 09:15:23
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heqin-1985

银虫 (小有名气)

谢谢大家,实验里再试试
10楼2012-01-10 23:35:26
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