应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DGGE电泳的问题
81/1返回列表
查看: 2016  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

491959728

铁虫 (小有名气)

[求助] DGGE电泳的问题

DGGE电泳需要欲电泳么？欲电泳是在上样前还是在上样后？欲电泳和正式电泳的电压和时间分别是多少？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-05-23 14:23:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励 2011-05-24 23:23:39
预电泳在上样前，200V，10min即可。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-05-23 14:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caisanrenju

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 很有经验啊，专家指数是必须给您的！ 2011-05-24 23:24:15
491959728(金币+5): 2011-05-29 19:28:25
最好预电泳一下，条带可以更漂亮。电泳前，按照你正式电泳时的电压预电泳30min。
正式电泳我一般用75V，14h，电压低的话条带会较漂亮。我们实验室的一个经验是
：电压X时间（h）=1000，这会是一个比较好的条件。当然还要根据聚丙烯酰胺胶的浓度，8%是比较合适的。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-05-24 23:16:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

良缘百合

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by caisanrenju at 2011-05-24 23:16:14:
最好预电泳一下，条带可以更漂亮。电泳前，按照你正式电泳时的电压预电泳30min。
正式电泳我一般用75V，14h，电压低的话条带会较漂亮。我们实验室的一个经验是
：电压X时间（h）=1000，这会是一个比较好的条件。 ...

真是太感谢了！
从本科后就没做过微观方面的实验，有个可能比较弱智的问题需要跟你请教下：为什么是在上样前预电泳呢？
上两个星期，我一直是在上样后200伏预电泳20min，80伏跑过夜，条带一直分不开，而且不清晰，可纠结了……
赞一下 回复此楼
爱家人爱学习爱生活
4楼2011-05-25 07:40:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caisanrenju

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-04 18:00:40
预电泳的目的是，不要让胶中的部分杂质影响到条带的电泳，使其预先跑出胶。
条带分不开，不一定是电泳时间和电压的问题，你可以分析:1.胶的变性范围是否合适2.聚丙烯酰胺胶的浓度是否偏大或小3.DNA提取和PCR条件是否造成严重偏好性
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-05-25 22:04:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

491959728

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by caisanrenju at 2011-05-25 22:04:23:
预电泳的目的是，不要让胶中的部分杂质影响到条带的电泳，使其预先跑出胶。
条带分不开，不一定是电泳时间和电压的问题，你可以分析:1.胶的变性范围是否合适2.聚丙烯酰胺胶的浓度是否偏大或小3.DNA提取和PCR条件 ...

预电泳在上样前？200V电泳10MIN可以吗？欲电泳时的温度也要在60度？
赞一下 回复此楼
6楼2011-07-04 17:32:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caisanrenju

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 491959728 at 2011-07-04 17:32:21:
预电泳在上样前？200V电泳10MIN可以吗？欲电泳时的温度也要在60度？

之所以为预，预电泳在上样前是肯定的！
至于预电泳的条件，我的理解是（Bio-Rad说明书上也这么写）既然是预电泳就要跟正式电泳的条件一样，当然也包括温度。对于很多人说的200V 10min，我不好说这样不对，但至少我不知道这么做的原因是什么。

个人经验，希望对你有帮助
赞一下 回复此楼
7楼2011-07-05 08:15:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang226296

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by caisanrenju at 2011-05-25 22:04:23
预电泳的目的是，不要让胶中的部分杂质影响到条带的电泳，使其预先跑出胶。
条带分不开，不一定是电泳时间和电压的问题，你可以分析:1.胶的变性范围是否合适2.聚丙烯酰胺胶的浓度是否偏大或小3.DNA提取和PCR条件是 ...

我的片段230bp左右，为什么不管8%，40-60%，50-70%都是这样，上面没有条带，下面又密呢，求指点啊
DGGE电泳的问题
GDO@T_C6}IBUIK206~TF5~9.jpg
赞一下 回复此楼
8楼2014-04-14 10:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 491959728 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 明天应该可查了！？ +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭