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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于PCR结果
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duanepp

木虫 (小有名气)

[求助] 关于PCR结果

小虫在做PCR后，琼脂糖电泳检测后发现。同一对引物，同样的体系，同样的电泳条件，不地区的同种的虫子，结果发现目的片段不在同一直线上，而是在目的片段（500bp）左右分布，这是为何？
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1楼 2012-12-06 09:53:09
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花尖尖

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
duanepp: 金币+2 2012-12-07 13:53:57
单核苷酸多肽（SNP），碱基突变，或缺失
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不向现实低头
2楼2012-12-06 10:34:06
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duanepp

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 花尖尖 at 2012-12-06 10:34:06
单核苷酸多肽（SNP），碱基突变，或缺失

这不应该啊！求真相！
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3楼2012-12-06 12:21:50
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花尖尖

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你可以把条带切下来，拿去测序，测序结果出来就知道是怎么回事啊。这个很正常。不同地方的有变异啊，亲。如果真这样，你这个就是新发现啊。接着做下去就知道结果了。
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不向现实低头
4楼2012-12-06 15:40:05
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花尖尖

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

还有可能，你要看是不是接近你的目的条带大小。如果不是，可能是引物二聚体，等等等。
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不向现实低头
5楼2012-12-06 15:41:13
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duanepp

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 花尖尖 at 2012-12-06 15:41:13
还有可能，你要看是不是接近你的目的条带大小。如果不是，可能是引物二聚体，等等等。

是在目的条带附近的。但是我换用另外一对引物做的话就没有这种现象。
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6楼2012-12-07 10:08:16
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花尖尖

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

因为不同，扩增出来的条带肯定不同啊。
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不向现实低头
7楼2012-12-07 10:24:51
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花尖尖

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
duanepp: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-12-07 13:53:22
引物不同，扩增出来的条带本来就不同。
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不向现实低头
8楼2012-12-07 10:25:54
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duanepp

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 花尖尖 at 2012-12-07 10:25:54
引物不同，扩增出来的条带本来就不同。

引物不同扩增出来的条带是不相同的。但是后者扩出来的片段检测是观察是在同一直线上的。而前者扩增出来产物则是在线的两侧。这是我想知道为什么？
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9楼2012-12-07 13:53:12
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gdj363702043

金虫 (正式写手)
如果有一个模板P出来以后是在正常长度范围  那就说明你的模板没问题，如果另一个虫子的RNA/DNA是同种条件下提的   那么你就可以肯定你的模板没问题   就要考虑一下测序     不可能是引物二聚体   那个一下就能辨别出来。   或者说你模板根本有问题  出现非特异性扩增
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加油努力
10楼2012-12-07 16:53:00
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