应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于PCR体系改变
91/1返回列表
查看: 1902  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

duane

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 关于PCR体系改变 已有6人参与

小虫最近在做pcr，从别人的文章中查到了pcr的体系总共是15ul。上下游引物个0.3ul，模板1ul，mix 7.5ul，水补齐。但是由于P出来的结果要测序，在这个15ul的体系下，检测需要4ul左右。剩下的10ul左右达不到测序的最低要求。所以想换个体系，做个25ul的。但是引物和模板的量不知道是怎么加的，那位好心的虫虫能够帮下忙给指点一下！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-05 16:10:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

追梦的人1987

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般来说是相应的增加倍数，模板，是需要根据纯度及浓度做相应的调整，
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-05 16:17:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duane

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 追梦的人1987 at 2012-12-05 16:17:00
一般来说是相应的增加倍数，模板，是需要根据纯度及浓度做相应的调整，

多谢了，还在摸索！
回复此楼
3楼2012-12-06 09:45:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dajiong

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
mix是2X的。25uL就加12.5么。剩下的模板1ul，引物各0.5，然后用水补足应该就可以了。
赞一下 回复此楼
哦也
4楼2012-12-06 12:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

diandong

禁虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
5楼2012-12-06 19:38:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duane

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by diandong at 2012-12-06 19:38:00
测序可以给菌液或质粒啊。

6楼2012-12-07 14:00:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小齐018

木虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你可以一次多p几管，我一般25微升体系的跑三管，回收的时候加30微升，两个孔平行，这样的话你胶回收的得率就会大一些，25微升体系：mix 12.5 水9.5 引物各1 模版1
赞一下 回复此楼
7楼2012-12-07 14:12:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heshenglin

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看不懂，我不会算体系。哎。
赞一下 回复此楼
8楼2013-10-08 16:51:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wencheng1109

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你就直接用15微升的做，多做几个，跑胶检测后混起来就可以了，体系变了可能做不出来，还得摸索条件，浪费时间

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
9楼2013-10-08 19:51:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 duane 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:15 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 6/300 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:51 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:29 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 yaCh4X3wd045 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 5BDX0d0WFp7t 2026-09-15 3/150 2026-09-17 06:50 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-17 02:14 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:14 by Tql5LQhh5rLK
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 8/400 2026-09-17 02:04 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-17 01:50 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-16 17:27 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-16 06:36 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:50 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 申博发邮件 +4 Lmengk 2026-09-15 4/200 2026-09-16 00:05 by 木心想继续深造
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭