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duane

至尊木虫 (正式写手)

应助: 30 (小学生)
金币: 11225.9
散金: 82
红花: 4
帖子: 996
在线: 333.8小时
虫号: 1107119
注册: 2010-09-25
专业: 农业昆虫学

[交流] 关于PCR体系改变已有6人参与

小虫最近在做pcr，从别人的文章中查到了pcr的体系总共是15ul。上下游引物个0.3ul，模板1ul，mix 7.5ul，水补齐。但是由于P出来的结果要测序，在这个15ul的体系下，检测需要4ul左右。剩下的10ul左右达不到测序的最低要求。所以想换个体系，做个25ul的。但是引物和模板的量不知道是怎么加的，那位好心的虫虫能够帮下忙给指点一下！

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1楼2012-12-05 16:10:15

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小齐018

木虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 3587
帖子: 31
在线: 18小时
虫号: 2143516
注册: 2012-11-23
性别: GG
专业: 植物资源学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

你可以一次多p几管，我一般25微升体系的跑三管，回收的时候加30微升，两个孔平行，这样的话你胶回收的得率就会大一些，25微升体系：mix 12.5 水9.5 引物各1 模版1

7楼2012-12-07 14:12:11

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