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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于PCR体系改变
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duane

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 关于PCR体系改变已有6人参与

小虫最近在做pcr，从别人的文章中查到了pcr的体系总共是15ul。上下游引物个0.3ul，模板1ul，mix 7.5ul，水补齐。但是由于P出来的结果要测序，在这个15ul的体系下，检测需要4ul左右。剩下的10ul左右达不到测序的最低要求。所以想换个体系，做个25ul的。但是引物和模板的量不知道是怎么加的，那位好心的虫虫能够帮下忙给指点一下！
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1楼2012-12-05 16:10:15
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wencheng1109

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你就直接用15微升的做，多做几个，跑胶检测后混起来就可以了，体系变了可能做不出来，还得摸索条件，浪费时间

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2013-10-08 19:51:15
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般来说是相应的增加倍数，模板，是需要根据纯度及浓度做相应的调整，
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2楼2012-12-05 16:17:00
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duane

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 追梦的人1987 at 2012-12-05 16:17:00
一般来说是相应的增加倍数，模板，是需要根据纯度及浓度做相应的调整，

多谢了，还在摸索！
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3楼2012-12-06 09:45:45
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dajiong

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
mix是2X的。25uL就加12.5么。剩下的模板1ul，引物各0.5，然后用水补足应该就可以了。
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哦也
4楼2012-12-06 12:33:39
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