| 查看: 1788 | 回复: 1 | ||
cai3110274木虫 (职业作家)
|
[求助]
求助关于real-time PCR 内参选择问题
|
| 我看到很多文献上说 现在 国外的杂志都要求两个或以上的内参基因来校正，我想了解下 如果选择两个不同内参，那么分析的时候以哪个为准呢 还是两个都要？还是有什么比较的方法？求解 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有186人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有2人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- Realtime PCR 内参与目的基因问题
已经有11人回复
- 求助 real-time PCR 曲线弯折 问题
已经有7人回复
- 求助！关于RT-PCR的问题！
已经有20人回复
- 请教real time pcr问题，谢谢！
已经有10人回复
- 关于real-time PCR温度优化的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】real time PCR如何去掉杂峰
已经有11人回复
- 【求助/交流】Real-time pcr
已经有4人回复
- 【求助/交流】RT-PCR ，内参在哪个步骤添加以及marker何时使用及确定？谢谢
已经有14人回复
- 【求助/交流】做realtime-PCR，退火温度很重要吗？
已经有15人回复
- 【求助/交流】关于real time PCR 的问题！
已经有3人回复
- 【求助/交流】Real time PCR 熔点曲线求助，谢谢
已经有12人回复
- 【求助/交流】关于pcr内参b-actine的一个问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于荧光定量PCR中cdna合成的问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】关于降落pcr的问题！
已经有4人回复
- 【求助/交流】RTPCR 内参
已经有4人回复
- 【求助/交流】RT-real time pcr问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】RNA的提取问题和qRT-PCR分析基因在不同时间的定量表达
已经有10人回复
- 【求助/交流】关于PCR的问题
已经有18人回复
- 【求助/交流】Real time RT-PCR 引物设计问题（高悬赏请高手帮忙）
已经有28人回复
henryxue
木虫 (小有名气)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 6043.7
- 红花: 1
- 帖子: 92
- 在线: 76.1小时
- 虫号: 2009319
- 注册: 2012-09-18
- 专业: 免疫生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cai3110274: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 非常感谢您 2012-12-02 21:48:51
感谢参与，应助指数 +1
cai3110274: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 非常感谢您 2012-12-02 21:48:51
|
我们实验室里所选的是biorad的实验和分析系统，软件中可以把两个内参都加上然后再作图，但貌似不能导入其他系统的数据…… 选择不同的内参，我所遇到的主要的情况就是细胞刺激后，内参基因也随之发生变化，从而导致内参不再具有参考性，因此选择多个内参来降低这种效应。 多内参的选择一定要有所区分，不要一个actin一个tubulin，这样是没有意义的，我在选择内参时，会选actin，18s rRNA以及GAPDH中的2个，主要是基于这3个内参基因代表了细胞内3种不同的功能。当然你也可以去查一些文献，有人专门对内参基因的选择做了研究。 如果有能力，还是上蛋白水平吧，除非miRNA之类的，否则realtime还是会有坑人的地方的，毕竟蛋白的半衰期、翻译后修饰才是真正体现蛋白在细胞内的活性，跟RNA的水平还是会有些差异的 |
2楼2012-12-02 13:59:56
