24小时热门版块排行榜    

查看: 4870  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

shuangzi8761

银虫 (著名写手)


[交流] 关于丙烯酰胺凝胶电泳跑DNA样品的几个问题

小弟最近做OVERLAP pcr,有几个片段大小为200-300bp,用1%琼脂糖电泳跑胶,发现有不少非特异性带,大小与目的带相差不到100bp,在胶上难以区分,因为还要回收片段,于是想用PAGE胶电泳。
这里几个问题,想请教大家:
1.PAGE胶的浓度和电压,多少为好?
2.maker用是不是用的还是琼脂糖电泳的MAKER, 是的话 上样量多少?
3.用PAGE电泳跑DNA,如何做回收??
4.如果不用page,采用琼脂糖电泳,提高做胶的浓度到2%,电压还是用原来跑1%的电压和时间吗?如果不是,如何改进?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)



shuangzi8761(金币+1): 谢谢参与
赞成加大凝胶浓度到2-3%,延长电泳时间。由于电泳时间长,所以可能会使缓冲液升温,最好换用新的便用buffer。
8楼2012-11-21 14:38:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)



shuangzi8761(金币+1): 谢谢参与
建议还是用琼脂糖凝胶电泳吧,PAGE上样量太小,回收产物少,你的情况可以将琼脂糖浓度提高到2%-3%,延长电泳时间,完全可以将你的片段分开,电泳时的电压取决于电极之间的距离,一般5-7v/cm,所以电压不用提高。
2楼2012-11-21 01:59:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungi_lwh

金虫 (著名写手)



shuangzi8761(金币+1): 谢谢参与
建议还是用琼脂糖凝胶电泳,加大胶的浓度,延长电泳时间

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2012-11-21 07:18:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gdj363702043

金虫 (正式写手)



shuangzi8761(金币+1): 谢谢参与
这种个情况都是用琼脂糖啊
4楼2012-11-21 09:49:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856求调剂285 +11 吕仔龙 2026-02-28 11/550 2026-03-02 20:15 by hypershenger
[考研] 材料类考研调剂 +3 gemmgemm 2026-03-01 4/200 2026-03-02 20:02 by hypershenger
[考研] 271求调剂 +3 Ricardo1113 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:53 by zhukairuo
[考研] 306分材料调剂 +5 chuanzhu川烛 2026-03-01 6/300 2026-03-02 19:51 by 张晓芳0105
[考研] 0805总分292,求调剂 +10 幻想之殇 2026-03-01 10/500 2026-03-02 19:51 by zhukairuo
[考研] 材料工程274求调剂 +5 Lilithan 2026-03-01 5/250 2026-03-02 19:39 by caszguilin
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +4 gaoxiaoniuma 2026-02-28 5/250 2026-03-02 19:33 by Xinyuu
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 15/750 2026-03-02 18:47 by caszguilin
[考研] 接收调剂 +6 津萌津萌 2026-03-02 13/650 2026-03-02 18:34 by fengyuling00
[考研] 一志愿东北大学化学314分求调剂 +3 lr1212.. 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:36 by yeahyou
[考研] 一志愿华中科技大学,化学专业344分,求调剂 +3 邢xing1 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:32 by houyaoxu
[考研] 0703 总分319求调剂 +3 Xinyuu 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:20 by houyaoxu
[考研] 0856化工专硕求调剂 +15 董boxing 2026-03-01 15/750 2026-03-02 15:06 by 晃晃不许晃
[考博] 诚招农业博士 +3 心欣向荣 2026-02-28 3/150 2026-03-02 13:33 by 时间不狗
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +4 weizhong123 2026-03-01 4/200 2026-03-02 12:46 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 3/150 2026-03-02 11:45 by 刘兵
[考研] 材料类求调剂 +11 wana_kiko 2026-02-28 14/700 2026-03-02 08:46 by 聪明的大松鼠
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[基金申请] 刚录用,没有期刊号,但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
信息提示
请填处理意见