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关于丙烯酰胺凝胶电泳跑DNA样品的几个问题
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shuangzi8761
银虫
(著名写手)
应助: 10
(幼儿园)
金币: 6472.4
帖子: 1549
在线: 309.3小时
虫号: 1449451
[交流]
关于丙烯酰胺凝胶电泳跑DNA样品的几个问题
小弟最近做OVERLAP pcr,有几个片段大小为200-300bp,用1%琼脂糖电泳跑胶,发现有不少非特异性带,大小与目的带相差不到100bp,在胶上难以区分,因为还要回收片段,于是想用PAGE胶电泳。
这里几个问题,想请教大家:
1.PAGE胶的浓度和电压,多少为好?
2.maker用是不是用的还是琼脂糖电泳的MAKER, 是的话 上样量多少?
3.用PAGE电泳跑DNA,如何做回收??
4.如果不用page,采用琼脂糖电泳,提高做胶的浓度到2%,电压还是用原来跑1%的电压和时间吗?如果不是,如何改进?
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2012-11-20 21:27:20
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jl860822
金虫
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★
shuangzi8761(金币+1): 谢谢参与
1%的胶的话,分离这么小的片段还是有点困难的,2%的吧
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7楼
2012-11-21 12:09:41
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