应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于蛋白多聚
71/1返回列表
查看: 2576  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dy_414

木虫 (正式写手)

[求助] 关于蛋白多聚

本人做膜蛋白，发现如下现象：
1. 真核表达，用12% SDS-PAGE接WB检测，发现目的蛋白都在膜的最上面，增加DTT的含量也一样（确定不是检测抗体非特异性吸附），但目的位置有较浅的条带。

2. 原核表达C末端片段，包涵体形式，PB（pH6.2）下复性后SDS-PAGE鉴定出现多聚（应该不是二硫键导致，因为确定有DTT）

请问如下原因：
1. 能否猜测是何种情况导致多聚（基本可以排除疏水作用和二硫键）
2. 如何对真核表达的样品进行处理使其出现在目的位置

多谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
我坚信，rp是攒出来的
1楼 2012-10-27 21:36:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)
自己顶一下
回复此楼
我坚信，rp是攒出来的
2楼2012-10-29 17:02:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)
再顶一下
3楼2012-11-03 21:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)
再顶下，嘿嘿

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
我坚信，rp是攒出来的
4楼2012-11-05 23:18:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠落叶

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dy_414: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-06 20:47:36
膜蛋白一般的都比较疏水吧，尤其是跨膜的那一段，可能是因为疏水相互作用造成的多聚的形成，所以说要是由于疏水太强造成的多聚加入DTT当然是不管用的，而且这类蛋白是不是还比较难溶解，具体的方法你再找找吧，适合你做实验的解决方法
赞一下 回复此楼
索马鲁肽，利拉鲁肽，德谷胰岛素，InsulinIcodec胰岛素侧链，发酵索玛/利拉直链热卖
5楼2012-11-06 09:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellolin

金虫 (小有名气)
请问楼主，但都都在膜的最上面是指哪个上面
赞一下 回复此楼
scienceguy
6楼2012-12-27 15:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chhy2014

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

形成多聚体的原因很多的，疏水作用、二硫键、蛋白质的错误折叠、温度、PH、离子强度等原因。你的蛋白纯度怎么样？我试验时也遇到蛋白形成多聚体的现象，优化DTT的含量后发现可以使聚体条带消除，但是我不确定除了目的条带以外的条带是目的条带聚集形成的，可能是目的蛋白和杂蛋白形成。还有你复性缓冲液选择合适吗？缓冲液的PH值选择合适吗？缓冲液选择（包括缓冲液PH值）不合适可能导致蛋白形成聚体。
赞一下 回复此楼
7楼2012-12-28 16:09:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dy_414 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 两块石头 +7 阿美_Lml888 2026-09-03 10/500 2026-09-06 20:08 by 阿美_Lml888
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 19:21 by eObJPa4gWmp6
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:41 by eObJPa4gWmp6
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:21 by eObJPa4gWmp6
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:09 by eObJPa4gWmp6
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:01 by eObJPa4gWmp6
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 17:21 by eObJPa4gWmp6
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 9/450 2026-09-06 17:09 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 8/400 2026-09-06 17:09 by eObJPa4gWmp6
[博后之家] 广西大学-广州大学招聘博士后 欢迎广大优秀人才！！！ +5 SCSIOyxguo 2026-09-03 8/400 2026-09-06 15:06 by 可爱小花朵
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 8/400 2026-09-06 11:09 by eObJPa4gWmp6
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 8/400 2026-09-06 11:00 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 4/200 2026-09-06 07:20 by E1iiBLMU2XnD
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 7ZYIEW2YWn72 2026-09-04 9/450 2026-09-06 06:00 by E1iiBLMU2XnD
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 CRJ0Aq2FtVH0 2026-09-03 15/750 2026-09-06 05:48 by E1iiBLMU2XnD
[基金申请] 面上没中，邀请各位路过的虫友分析一下分数 +12 jackleilei 2026-09-03 13/650 2026-09-05 18:10 by fireguard
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +6 瞬息宇宙 2026-08-31 9/450 2026-09-05 13:11 by haizai99
[硕博家园] 哈尔滨工业大学韩晓军教授课题组招收2027年硕士推免生及博士研究生 +3 灯灯灯灯DDDD 2026-09-03 3/150 2026-09-03 21:22 by 科研皮皮猪
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭