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dy_414木虫 (正式写手)
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关于蛋白多聚
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本人做膜蛋白,发现如下现象: 1. 真核表达,用12% SDS-PAGE接WB检测,发现目的蛋白都在膜的最上面,增加DTT的含量也一样(确定不是检测抗体非特异性吸附),但目的位置有较浅的条带。 2. 原核表达C末端片段,包涵体形式,PB(pH6.2)下复性后SDS-PAGE鉴定出现多聚(应该不是二硫键导致,因为确定有DTT) 请问如下原因: 1. 能否猜测是何种情况导致多聚(基本可以排除疏水作用和二硫键) 2. 如何对真核表达的样品进行处理使其出现在目的位置 多谢! |
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