| 查看: 3182 | 回复: 9 | ||||
qlw4567铁杆木虫 (著名写手)
|
[求助]
关于蛋白质多聚体检测问题。
|
| 如题，我现在做牛血清蛋白的分离试验，但是在不同浓度下我认为它含有不同量的多聚体蛋白质，有什么办法能测出BSA溶液里面多聚体的含量，或者BSA单体的含量也行。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白质生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
270分求调剂
已经有3人回复
-
材料调剂
已经有4人回复
-
材料0856 英一数二 323 求调剂
已经有13人回复
-
化学0703-一志愿211-338分求调剂
已经有5人回复
-
调剂
已经有4人回复
-
一志愿北交大材料工程总分358求调剂
已经有6人回复
-
求调剂
已经有6人回复
-
一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂
已经有8人回复
-
304求调剂（085602，过四级，一志愿985）
已经有15人回复
-
工科求调剂
已经有15人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- MALDI-TOF-MS检测蛋白质的准确度是多少
已经有9人回复
- 求助在HPLC上检测蛋白质的波长选择
已经有4人回复
- 石墨烯最新发现,荧光石墨烯,可用作生物传感器,检测多肽,蛋白质和DNA
已经有34人回复
- 如何检测硫酸软骨素中是否含有蛋白质
已经有4人回复
- 转录组研究前沿
已经有21人回复
- 蛋白质单体及其多聚体？？？
已经有9人回复
- 蛋白质多聚体的形成与pH变化有什么关系呢？
已经有7人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 关于蛋白质检测方法可以向那些SCI杂志投稿？
已经有4人回复
- 【原创】2010药典与2005版药典三部药典修改以及新增
已经有6人回复
- 【资源】液相色谱常见问题及处理方法
已经有43人回复
- 微生物学考研资料1(沈萍版同步）免币分享
已经有67人回复
qlw4567
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 48 (小学生)
- 金币: 9363.2
- 散金: 686
- 红花: 8
- 帖子: 1176
- 在线: 106.5小时
- 虫号: 1189211
- 注册: 2011-01-13
- 性别: GG
- 专业: 功能与智能高分子
2楼2013-05-10 09:20:19
stevenshi021
新虫 (小有名气)
- BioEPI: 1
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 545.3
- 红花: 5
- 帖子: 276
- 在线: 35.1小时
- 虫号: 2272292
- 注册: 2013-02-03
- 专业: 生物化学
3楼2013-05-10 11:17:17
qlw4567
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 48 (小学生)
- 金币: 9363.2
- 散金: 686
- 红花: 8
- 帖子: 1176
- 在线: 106.5小时
- 虫号: 1189211
- 注册: 2011-01-13
- 性别: GG
- 专业: 功能与智能高分子
4楼2013-05-10 15:23:05
qlw4567
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 48 (小学生)
- 金币: 9363.2
- 散金: 686
- 红花: 8
- 帖子: 1176
- 在线: 106.5小时
- 虫号: 1189211
- 注册: 2011-01-13
- 性别: GG
- 专业: 功能与智能高分子
5楼2013-05-10 15:25:49
stevenshi021
新虫 (小有名气)
- BioEPI: 1
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 545.3
- 红花: 5
- 帖子: 276
- 在线: 35.1小时
- 虫号: 2272292
- 注册: 2013-02-03
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
qlw4567: 金币+50, ★★★很有帮助, 谢谢您的帮助，虽然还有些疑问，但是金币给您了。 2013-05-12 10:36:37
qlw4567: 金币+50, ★★★很有帮助, 谢谢您的帮助，虽然还有些疑问，但是金币给您了。 2013-05-12 10:36:37
| 是,你可以通过粒径分布确定聚合体分布情况, 关于分子筛堵柱子是有这样的风险，主要还是看你所谓的聚集是多大的粒径了，如果小的话分子筛应该没有问题。DSL好像不太存在这样的堵塞柱子的问题。我突然想到还有一种粗糙的办法就是走非变性胶（native-PAGE）,但是这种方法有时候不是很可信，还是前两种方法比较靠谱。 |
6楼2013-05-12 07:14:05
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - BioEPI: 11
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
|
现用非变性的分子筛层析或者非变性凝胶电泳测定一下可能的BSA（牛血清白蛋白）的聚合体的相对分子量，非变性凝胶电泳可以测定蛋白质的相对分子量，但有时不太准，因为还与蛋白质的空间构象有关系。因为分子筛层析或者凝胶电泳测定一下可能的BSA（牛血清白蛋白的聚合体的相对分子量）多少都是BSA大致呈现倍数关系。所以可以测定出来。至于有人说：分子筛层析上样聚合体会堵住层析柱，这是可能的，不过上样前应该过滤除去不溶物，不然不仅分子筛层析会堵，非变性凝胶电泳照样也走不动。这样可以按测出来BSA（牛血清白蛋白）的聚合体的相对分子量。要知道BSA（牛血清白蛋白）的聚合体的在溶液中的含量，那么只要在非变性条件下，把可能的BSA（牛血清白蛋白）的聚合体按照不同聚合程度的相对分子量分离出来，然后用福林酚方法、紫外吸收法可以通过光谱检测出来溶液中的蛋白质的含量，另外也可以从层析柱的色谱峰的面积读出蛋白质的含量（有专门的积分仪器和软件）。 具体可以参考： 1.吕宪禹 主编，蛋白质纯化实验方案与应用，化学工业出版社，2010， http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6307126 2.汪正范 编著，色谱定性与定量，化学工业出版社，2000. http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6427417 |
7楼2014-08-24 16:38:49
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - BioEPI: 11
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
8楼2014-08-24 17:34:02
qlw4567
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 48 (小学生)
- 金币: 9363.2
- 散金: 686
- 红花: 8
- 帖子: 1176
- 在线: 106.5小时
- 虫号: 1189211
- 注册: 2011-01-13
- 性别: GG
- 专业: 功能与智能高分子
9楼2014-08-25 07:26:34
qlw4567
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 48 (小学生)
- 金币: 9363.2
- 散金: 686
- 红花: 8
- 帖子: 1176
- 在线: 106.5小时
- 虫号: 1189211
- 注册: 2011-01-13
- 性别: GG
- 专业: 功能与智能高分子
10楼2014-08-25 07:26:46
5