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PCR 溶解曲线乱、ct值高 怎么办
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新手一枚，RT-PCR不理想，溶解曲线乱且ct值高，望各位高人指导！感激不尽！ 脑组织RNA浓度 样本一：2200ng/ul 260/280 1.84； 样本二：11000ng/ul 260/280 1.94； 样本三：2400ng/ul 260/280 1.87； 第二天，调整浓度至1000ng/ul，逆转录 第三天，扩增 SYBR Premix Ex Taq II 10 ul PCR Forward Primer 0.8 ul PCR Reverse Primer 0.8 ul DNA模版 2.0 ul dH2O 6.4 ul Total 20 ul stage1：95℃ 30s 20℃/s 1 Cycle stage2：95℃ 5s 20℃/s 62℃ 20s 20℃/s 40 Cycle 内参和目的ct值都在30以上 |
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