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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-12-12 08:23:56
我有个小小的问题,因为RNA是及其不稳定的,用没有逆转录的RNA作为模板这个时候RNA是不是已经降解了呢?...

做荧光定量用的酶是DNA聚合酶,不能以RNA为模板,所以才叫负对照,就是不扩增的。主要是看RNA样品中是否存在痕量基因组DNA。如果DNA消化完全的话,负对照的CT值是∞。
11楼2012-12-12 09:12:15
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-12 09:12:15
做荧光定量用的酶是DNA聚合酶,不能以RNA为模板,所以才叫负对照,就是不扩增的。主要是看RNA样品中是否存在痕量基因组DNA。如果DNA消化完全的话,负对照的CT值是∞。...

哦  Got it 3Q
keepon
12楼2012-12-13 09:13:33
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dkyy970111

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

模板浓度太高,稀释100倍再做。
打铁还要自身硬
13楼2012-12-13 14:50:23
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