24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3122  |  回复: 28
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] 最近做的菌落pcr,可以做胶回收吗? 已有1人参与

如标题,最近跑的菌落pcr,1-3有拖尾和弥散,但是目的带很亮,产生这种现象的原因是什么啊,杂质比较多吗;4和5的模板是DNA,不是菌落,目的带比较弱,小弟想问一下1-3可不可做胶回收然后连T载体做克隆啊,还要优化pcr条件吗?

eric 2012-09-25 21hr 01min1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by weining1203 at 2012-09-26 10:32:46
谢谢!现在重新设计了一条带酶切位点的引物做的pcr,让目的基因两边加上酶切位点,然后做原核表达!之前菌里面的目的基因没有酶切位点!请问mini-prep是什么,本人是新手,不懂啊,恳求指点...

你的目的基因不在克隆载体里面吗?对不起我之前不知道。我以为你是用菌落PCR筛选阳性克隆。现在用引物引入酶切位点是比较常用的克隆方法。mini-prep是用试剂盒小规模纯化质粒。
9楼2012-09-26 11:21:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 29 个回答

wu_shiyong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌液PCR这种情况正常,可以切胶回收后接着做克隆!
低调稳重务实内敛---------------残
2楼2012-09-26 09:44:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌落PCR杂质多,不建议回收做克隆。做连用不了多少DNA的,回收多了也没用,一般50ul的PCR产物足以。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2012-09-26 09:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weining1203

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-09-26 09:48:18
菌落PCR杂质多,不建议回收做克隆。做连用不了多少DNA的,回收多了也没用,一般50ul的PCR产物足以。

谢谢回复,您好楼上的说的相反,有点迷茫啊
4楼2012-09-26 10:11:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0832食品科学与工程学硕282调剂 +6 鱼在水中游a 2026-04-02 9/450 2026-04-05 11:45 by flysky1234
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +10 梁富贵险中求 2026-04-04 12/600 2026-04-05 09:37 by guoweigw
[考研] 材料与化工371求调剂 +8 陪琳看海 2026-04-04 8/400 2026-04-05 09:10 by guoweigw
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 23:10 by 无际的草原
[考研] 344材料与化工调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:10 by happyddm
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +9 王一一依依 2026-03-30 12/600 2026-04-04 20:55 by dongzh2009
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
[考研] 一志愿双非085502,267分,过四级求调剂 +3 再忙也要吃饭啊 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:03 by gswylq
[考研] 310求调剂 +18 争取九点睡 2026-03-30 18/900 2026-04-03 18:35 by ls刘帅
[考研] 求调剂 +3 usbdndj 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:10 by dxiaoxin
[考研] 321求调剂 +17 y-yh 2026-04-01 20/1000 2026-04-03 12:57 by y-yh
[考研] 260求调剂 +6 朱芷琳 2026-04-02 6/300 2026-04-02 20:27 by 6781022
[考研] 环境工程297分求调剂一志愿杭高院 +15 GENJIOW 2026-03-31 16/800 2026-04-02 17:56 by cyh—315
[考研] 07生物学求调剂 一志愿同济大学359分 +3 LAMC. 2026-03-30 3/150 2026-04-02 10:26 by 18828373951
[考研] 353求调剂 +4 拉钩不许变 2026-04-01 4/200 2026-04-01 18:10 by 记事本2026
[考研] 材料专业调剂 +5 啦啦啦哭 2026-03-31 6/300 2026-04-01 16:48 by JourneyLucky
[考研] 08工科275求调剂,可跨考。 +5 AaAa7420 2026-03-31 5/250 2026-04-01 15:21 by 159357hjz
[考研] 考研生物与医药调剂 +7 铁憨憨123425 2026-03-31 7/350 2026-04-01 08:45 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料357 +4 麦恩莉. 2026-03-30 4/200 2026-03-31 14:35 by 记事本2026
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
信息提示
请填处理意见