24小时热门版块排行榜    

查看: 4728  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

王艳xinwei

银虫 (小有名气)

[求助] 转化后菌落pcr有目的条带,小摇长菌,再大摇不长了,求帮助~

各位虫友,我最近做了两批农杆菌转化,挑单菌落小摇后做菌液PCR,有目的条带,接着就开始大摇,大概20-30ml加2-3菌液,做了六瓶,一点都没长,没找到原因,接着我又挑了一次菌落,又小摇浑浊,做了菌液PCR,有目的条带,再继续大摇,还是一点都没长,很是让我悲伤,不知道问题出现在哪地方了。。。。。。我每次的培养基都是YEB,且加的抗生素都一致,不过我小摇后的菌是放在四度冰箱做完菌液PCR后大摇的,这有影响吗?找不到原因了,是感受态做的不好吗,还是其他的原因。。。。。。求帮助
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

坚持就是胜利
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peitaokong

银虫 (小有名气)

一般小摇后,用甘油和菌种以1:1的比例混匀,保存后置于-80度冰箱里。在-4度的冰箱几个小时还行,时间长了,会影响菌种的活性的。
9楼2012-08-29 08:01:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peitaokong

银虫 (小有名气)

应该问题出在保存菌种时的方法欠妥。你如果小摇后,立即大摇,如果仍旧摇不起来,则可能是其他的问题。如果立即大摇能摇起来,就是你的保存菌种的方法欠妥。
10楼2012-08-29 08:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王艳xinwei 的主题更新
信息提示
请填处理意见