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njqzc

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于蛋白纯化

我的蛋白大小在7KD左右,真菌发酵的,分泌表达,杂蛋白很大,不带有任何标签,该采用什么分离纯化方法呢?另发酵液中有好多色素,该怎样去除?
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成功进步!

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
leecius: 金币+2, 谢谢参与。 2012-07-21 08:42:29
30KD或100KD的超滤膜包超滤收集透过液,再选择10KD的超滤膜包超滤收集回流液。
2楼2012-07-20 22:04:31
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njqzc

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 成功进步! at 2012-07-20 22:04:31
30KD或100KD的超滤膜包超滤收集透过液,再选择10KD的超滤膜包超滤收集回流液。

你好,你说的超滤膜是指小的超滤膜吗,用于离心的那种。那种的处理量很小,我的发酵液有几升呢,该怎么办?
3楼2012-07-23 11:03:04
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成功进步!

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
njqzc: 金币+2 2012-07-28 19:56:59
是膜包,不是那种一张膜的,可以循环处理的,我做的都是100多升的,只不过我的是细菌需要先离心去掉菌体。
4楼2012-07-27 21:16:03
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hugh_811

金虫 (小有名气)

不知道你的经费是否够用,如果可以拿出两三万来买套超滤装置用来做预处理还是很好用的。就是楼上说的那种平板式超滤膜。你几升的料液选择0.1平方米的膜包就好了。建议使用100K的收集透过液,5K的浓缩收集回流。个人感觉7K的蛋白,用10K的收集透过的可能性会大一些。
对于除色素可以试一试大孔吸附树脂。只知道这么多,希望对你有帮助。
5楼2012-12-05 16:31:24
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