24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 4316  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xuemei1984

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by xuemei1984 at 2012-06-23 10:05:39
我的产物片段是141bp,最后一条marker大小是125bp。而且我做过普通pcr结果也是这样的,并且Tm值84度左右,只是我的目的基因表达量较低,条带较弱,应该不是引物二聚体。...

建议你换DL500marker跑胶,而且从你溶解曲线上看也是有杂峰的,说明可能有引物二聚体的干扰,建议你少加点引物同时提高下退火温度
7楼2012-06-23 10:31:15
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

l_h_10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助哦 2012-06-22 13:33:39
xuemei1984: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-06-23 09:57:10
从图上看,是引物二聚体的峰有干扰,我觉得可以减少引物量。之前也为这个问题困扰过,我的问题是普通定量出现引物二聚体,实时定量也出现,后面把引物量减少一半就好了(试过把引物量减少一倍或者把模板量加大一倍,发现引物量减少效果更好)。
2楼2012-06-21 23:03:54
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

改三步法试试吧,可以显著改善特异性。
3楼2012-06-22 00:56:19
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xuemei1984: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-06-23 09:57:58
从图中我觉得还是引物不合适。建议:较严格按着realtime-PCR引物设计原则设计,引物Tm高些。还有做PCR时,药品颠倒混匀,尤其是SYBR,我在做试验中觉得PCR mixture 混合不好,也影响PCR扩增。 这个不错你可以看看《TAKARA荧光定量PCR宝典》
4楼2012-06-22 16:22:31
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +20 luoziheng 2026-04-10 22/1100 2026-04-14 13:24 by zhoujxmail
[考研] 求调剂学校 +7 不会吃肉 2026-04-13 7/350 2026-04-14 11:09 by LNTU-smj
[考研] 材料085601调剂 +32 何润采123 2026-04-10 34/1700 2026-04-14 08:47 by 木木mumu~
[考研] 本科西工大 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-13 23:08 by pies112
[考研] 考研调剂 +11 长弓傲 2026-04-13 12/600 2026-04-13 22:48 by pies112
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-12 13/650 2026-04-13 17:32 by 长弓傲
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 一志愿西北工业大学289 085602 +33 yang婷 2026-04-10 34/1700 2026-04-12 08:11 by Art1977
[考研] 药学专硕调剂 +8 ? 一路生?花? 2026-04-10 10/500 2026-04-11 21:21 by zhouxiaoyu
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 考研调剂 +26 硕星赴 2026-04-09 27/1350 2026-04-10 22:24 by 猪会飞
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +6 白云123456789 2026-04-09 8/400 2026-04-10 21:13 by zhouxiaoyu
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550, 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 311求调剂 +6 surte 2026-04-08 13/650 2026-04-09 14:00 by surte
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 388求调剂 +6 四川王涛 2026-04-07 8/400 2026-04-08 00:17 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见