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蛋白之家

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
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在线: 28.5小时
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[交流] 关于酶切后的连接问题，共同探讨共同进步

各位大侠
为什么酶切切下来也能回收上，就是回收的时候浓度小，但连了好多次都连不上啊试过4:1 ，3:1的比例，不是说连接的时候3:1的比例是最好的么为什么连不上啊很纠结
希望各位大侠前来帮忙，谢谢!

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1楼2012-05-29 15:05:57

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蓝心1728

木虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白之家: 回帖置顶 2012-05-30 15:01:11
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, Good！ 2012-05-31 09:13:47

1、如果酶切以后浓度低的话，可以多切几管，并在一起，回收后打开盖子，晾一晚，相当于稍微浓缩下
2、连接前，至少点5微升溶液可以看到条带，虽然连接成败主要看比例，但若浓度太低效果不好
3、连接比例可以按DNA片段与载体质量比7:1~10:1间，可以一次多尝试几个比例,增大成功几率
4、连接后转化的感受态效率也很重要，若感受态效率太低也无法得到想要的克隆
5、祝你好运