| 查看: 4105 | 回复: 20 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
shengnan1987铁虫 (初入文坛)
|
[求助]
带HIS标签的可溶蛋白的纯化问题
|
||
|
我做的是一种蛋白酶的原核表达，c端带一个his标签，大小31kd，等电点10，pet24a可溶表达，但表达量不高，不到50%，用镍柱纯化，Binding: 20 mM sodium phosphate, 20 mM Imidazole,500 mM NaCl, PH 8.0 Elution: 20 mM sodium phosphate, 500 mM Imidazole, 500 mM NaCl, PH8.0 调整咪唑的浓度，要么峰型好，但杂带还是很多；要么没有特异的峰出现。请问各位高手有没有好的纯化方法？非常感谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有217人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 带GST标签的融合蛋白的纯化问题——急急急
已经有4人回复
- 组氨酸标签重组蛋白纯化
已经有10人回复
- 如何在蛋白纯化后去除6组氨酸(6His)标签
已经有17人回复
- gst标签蛋白的表达和纯化
已经有17人回复
- AMPK蛋白纯化问题讨论
已经有21人回复
- 蛋白互作必会，GST纯化遇到的问题
已经有13人回复
- his标签蛋白纯化，不挂柱
已经有18人回复
- gst标签，蛋白纯化
已经有25人回复
- 蛋白纯化分离问题
已经有19人回复
- 关于蛋白纯化的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】酵母表达可溶性蛋白问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】蛋白质纯化的疑难问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】急！急！急！ his标签表达的蛋白出问题了，求指导！！！
已经有7人回复
- 【求助/交流】为什么镍柱纯化可溶性蛋白，电泳结果总是显示不纯呢？
已经有9人回复
- 基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
已经有26人回复
jasonwyb123
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 1229.6
- 红花: 1
- 帖子: 205
- 在线: 29.5小时
- 虫号: 1751129
- 注册: 2012-04-12
- 专业: 蛋白质组学
8楼2012-05-28 14:49:17
孙启亮
金虫 (著名写手)
- MolEPI: 6
- 应助: 121 (高中生)
- 贵宾: 0.216
- 金币: 2881.3
- 散金: 2546
- 红花: 23
- 沙发: 19
- 帖子: 2792
- 在线: 677.4小时
- 虫号: 1112263
- 注册: 2010-10-01
- 性别: GG
- 专业: 前寒武纪地质学
西瓜: 金币-40, 2楼赞助楼主散金 2012-05-27 18:43:25
西瓜: 金币-40, 2楼赞助楼主散金 2012-05-27 18:43:36
西瓜: 金币-20, 2楼赞助楼主散金。共100金币。 2012-05-27 18:44:08
西瓜: 金币+50, 返回之前赞助金币 2012-06-04 14:35:09
西瓜: 金币+50, 返回之前赞助金币 2012-06-04 14:35:18
西瓜: 金币-40, 2楼赞助楼主散金 2012-05-27 18:43:36
西瓜: 金币-20, 2楼赞助楼主散金。共100金币。 2012-05-27 18:44:08
西瓜: 金币+50, 返回之前赞助金币 2012-06-04 14:35:09
西瓜: 金币+50, 返回之前赞助金币 2012-06-04 14:35:18
| 我回帖赞助你金币，1个BB太少了 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
shengnan19872楼2012-05-27 18:39:39
shengnan1987
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 42
- 帖子: 12
- 在线: 14.4小时
- 虫号: 1118306
- 注册: 2010-10-10
- 性别: MM
- 专业: 预防医学其他科学问题
谢谢！没经验 3楼2012-05-27 22:44:51
4楼2012-05-28 07:56:14
