24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2196  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

光武故里

木虫 (小有名气)

[求助] 请大家帮我分析一下这张植物块根中提取的基因组DNA电泳图片

今天下午提了一种植物块根的基因组DNA,因为其富含多糖,使用的是改良的CTAB法,采取以下流程:首先在装有粉状样品的离心管中加入2×CTAB裂解液(内含3% PVP)600ul 以及100ul β-巯基乙醇,65℃水浴60min,然后用A【氯仿:异戊醇/24:1】以及B【酚:氯仿:异戊醇/25:24:1】交替抽提后离心,先后顺序依次为:A——A——B——A——B——A,接着离心取上清液,加入-20℃预冷的异丙醇,并放置-20℃冰箱,60min后取出离心,得沉淀(但是实际情况是离心后并无可见的沉淀),用70%的乙醇小心洗涤2次,后用无水乙醇洗涤一次,风干沉淀,加入100ul TE溶解。

其中离心参数为:4℃,12000rpm,10min

电泳检测如图所示:左边是MARKER,最大片段长5000bp,右边是提的DNA,明显感觉不对头啊,请各位帮忙分析找找原因,十分谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuaile-RJ

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 光武故里 at 2012-05-22 09:46:07:
RJ,非常感谢,我始终觉得最上面的DNA片段不够大(离MARKER5000bp的好近),是不是电压100v太高,没跑开的原因呢?

你可以考虑换个15000的Marker试试,从你的电泳图看,应该是基因组DNA,它离RNA的距离是正常的。还有你-的marker最大就5000,上面的你不能简单的看远近来判断大小,其实上面的5000和8000甚至10000相差都不太远。应该是没有问题的。如果楼主实在不放心,换个大一些的marker试试。
5楼2012-05-22 23:55:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

光武故里

木虫 (小有名气)

补充:胶是2%的,100V,30min
2楼2012-05-21 18:43:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuaile-RJ

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+3, 鼓励交流~欢迎常来~ 2012-05-22 08:31:51
光武故里: 金币+2, 非常感谢! 2012-05-22 09:41:43
从你的电泳图看,提的效果还可以啊,最上面的一条带应该就是基因组DNA啊,下面的是RNA,而且没有较多多糖污染啊(稍微有一些),点样孔比较干净。不知道楼主测浓度了没有,可以考虑纯化,加RNA酶除去RNA,不过要看楼主提DNA干什么用了,呵呵!还有沉淀后离心一步应该是有沉淀的,可能是透明状的没观察到而已,而且沉淀多了也不好,大都是杂质,不知道楼主起始材料量是多大呢?
3楼2012-05-22 00:04:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

光武故里

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kuaile-RJ at 2012-05-22 00:04:35:
从你的电泳图看,提的效果还可以啊,最上面的一条带应该就是基因组DNA啊,下面的是RNA,而且没有较多多糖污染啊(稍微有一些),点样孔比较干净。不知道楼主测浓度了没有,可以考虑纯化,加RNA酶除去RNA,不过要看楼

RJ,非常感谢,我始终觉得最上面的DNA片段不够大(离MARKER5000bp的好近),是不是电压100v太高,没跑开的原因呢?
4楼2012-05-22 09:46:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 348分 +10 唉我超真没招了 2026-04-06 10/500 2026-04-08 00:45 by JourneyLucky
[考研] 278求调剂 +13 范婷娜 2026-04-07 14/700 2026-04-07 22:42 by 来看流星雨10
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +16 梁富贵险中求 2026-04-04 17/850 2026-04-07 22:11 by lijunpoly
[考研] 290求调剂085701 +15 1314捧花 2026-04-02 16/800 2026-04-07 18:15 by 蓝云思雨
[考研] 280求调剂 +7 李rien 2026-04-04 7/350 2026-04-07 17:33 by 蓝云思雨
[考研] 283求调剂 +18 A child 2026-04-04 18/900 2026-04-07 12:30 by 1018329917
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +7 墨彧 yuyu 2026-04-06 7/350 2026-04-07 08:58 by Jaylen.
[考研] 287求调剂 +3 通信学硕081000 2026-04-03 4/200 2026-04-06 21:03 by going home
[考研] 调剂 一志愿吉林大学357分 +5 .Starry. 2026-04-04 5/250 2026-04-06 09:28 by cql1109
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二!! 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 286求调剂 +3 草木不言 2026-04-04 3/150 2026-04-04 22:40 by lbsjt
[考研] 调剂 +11 JLLLLLLLLLL 2026-04-03 11/550 2026-04-04 22:21 by hemengdong
[考研] 0835学硕299求调剂 08大类可接受 +5 useryy 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:07 by 蓝云思雨
[考研] 298求调剂 +5 zzz,,r 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:55 by 蓝云思雨
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 一志愿北京科技大学材料工程085601,求调剂 +17 cdyw 2026-04-02 18/900 2026-04-04 11:14 by w_xuqing
[考研] 一志愿大工学硕,求调剂 +4 yub0811 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:36 by 百灵童888
[考研] 农学考研求调剂 +3 dkdkxm 2026-04-01 3/150 2026-04-02 16:04 by wangjagri
[考研] 321求调剂 一志愿 浙江工业大学生物医药 +5 嘿嘿HC 2026-04-01 6/300 2026-04-02 15:23 by sophie2180
[考研] 08工科求调剂290分 +5 1314捧花 2026-04-02 8/400 2026-04-02 13:16 by 乔哒哒哒
信息提示
请填处理意见