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ciciweiwei

铁虫 (初入文坛)

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专业: 色谱分析

[求助] PCR产物的电泳条带出问题了！加了oading buffer和不加loading buffer的大小不一样！！已有1人参与

如图，本来上样的时候一时分心忘了加loading buffer了，因为之前电泳就一直没跑好也怀疑过可能跟loading buffer有关，索性就做了加loading buffer和没加loading buffer的对比。1,3,5,6,7是加了loading buffer的，2和4没有加。
所有的样都是同样的引物，PCR条件不一样。很奇怪，究竟是引物不行压根没P出来还是怎么回事，已经为PCR的问题纠结了一个多月了。恳求各位帮忙！！！

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1楼 2012-03-29 18:53:15

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2B青年2B青年

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

你这个是正常的没有加loading buffer的条带跑出来显示比加了loading buffer的条带要略大这是因为Taq酶结合在DNA上的结果导致迁移率下降 10*loading buffer里面是有SDS的加了loading buffer之后 Taq会变性脱离因而条带显示的小点

赞一下(2人)

12楼2012-11-30 20:59:37

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