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ciciweiwei

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物的电泳条带出问题了!加了oading buffer和不加loading buffer的大小不一样!!已有1人参与

如图,本来上样的时候一时分心忘了加loading buffer了,因为之前电泳就一直没跑好也怀疑过可能跟loading buffer有关,索性就做了加loading buffer和没加loading buffer的对比。1,3,5,6,7是加了loading buffer的,2和4没有加。
所有的样都是同样的引物,PCR条件不一样。很奇怪,究竟是引物不行压根没P出来还是怎么回事,已经为PCR的问题纠结了一个多月了。恳求各位帮忙!!!
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2B青年2B青年

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你这个是正常的  没有加loading buffer的条带跑出来显示比加了loading buffer的条带要略大 这是因为Taq酶结合在DNA上的结果 导致迁移率下降  10*loading buffer里面是有SDS的  加了loading buffer之后 Taq会变性 脱离 因而条带显示的小点
12楼2012-11-30 20:59:37
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不是一样的样品吧?同一个样品,加/不加loading buffer,这样子比较才有意义哦。
2楼2012-03-29 19:37:35
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水果的滋味

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不加buffer怎么能有颜色,换个试剂,之前我也是因为这个问题,浪费了一个多月的时间纠结
3楼2012-03-29 20:00:01
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xiaoyugutou

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不加loading 样品是怎么沉到上样孔里的呢?
4楼2012-03-29 20:00:14
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