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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达形成了包涵体怎么办啊？
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ningxi123456

金虫 (小有名气)

[求助] 原核表达形成了包涵体怎么办啊？

我的目的基因是水稻中克隆出来的，连到PET24上做原核表达，表达出来了，大小也对，但是在纯化跑SDS-PAGE电泳后发现它在沉淀里面，形成了包涵体。该怎么办啊？原核表达我都做了半年了，现在形成了包涵体，更是郁闷，各位大侠，谁能帮我解决下啊，感激不尽~！！！
      我的目的蛋白大概38Da，按1:100加入500ml的LB培养基中摇菌至OD600=0.6，加入0.7mM的IPTG，37°C诱导三个小时。
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1楼2012-03-26 15:53:54
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yanfeier

金虫 (小有名气)
降低温度、降低诱导剂浓度以及换别的表达载体确实是不错的选择。若是还不可以的话那就尝试着蛋白复性，如果是你的目的只是拿到部分蛋白做表征之类的应该是足够了，你也可以选择尝试真核表达，有时也是可以实现可溶性表达的。
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8楼2012-04-06 15:18:16
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