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原核表达形成了包涵体怎么办啊?
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ningxi123456
金虫
(小有名气)
应助: 1
(幼儿园)
金币: 534.5
红花: 3
帖子: 65
在线: 27.5小时
虫号: 1004286
注册: 2010-04-23
性别:
MM
专业: 植物学研究的新技术、新方
[
求助
]
原核表达形成了包涵体怎么办啊?
我的目的基因是水稻中克隆出来的,连到PET24上做原核表达,表达出来了,大小也对,但是在纯化跑SDS-PAGE电泳后发现它在沉淀里面,形成了包涵体。该怎么办啊?原核表达我都做了半年了,现在形成了包涵体,更是郁闷,各位大侠,谁能帮我解决下啊,感激不尽~!!!
我的目的蛋白大概38Da,按1:100加入500ml的LB培养基中摇菌至OD600=0.6,加入0.7mM的IPTG,37°C诱导三个小时。
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[求助]原核表达如何减少包涵体
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1楼
2012-03-26 15:53:54
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btx362237729
金虫
(正式写手)
应助: 18
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金币: 927.7
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红花: 3
帖子: 745
在线: 66.3小时
虫号: 1069351
注册: 2010-08-04
性别: GG
专业: 疫苗学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ningxi123456: 金币+4
2012-04-25 20:31:26
降低温度 增加IPTG浓度 换载体
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人生最黑暗的时光终于过去了
9楼
2012-04-06 18:39:03
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