应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 营养安全 » 蛋白酶解后 得到的肽 比蛋白还多 求高人解释一下
131/2返回列表12下一页
查看: 3764  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sun880806

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白酶解后 得到的肽 比蛋白还多 求高人解释一下

本人 用碱性蛋白酶 酶解蛋白，蛋白浓度100mg/mL，酶解后用三氯乙酸法测酸溶肽，标准物质选的是谷胱甘肽，测得的酸溶肽竟然达到了120mL/mL，我不知道这样的结果是不是合理，恳请高人帮忙解释一下
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
小硕
1楼 2012-03-05 23:11:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sun880806(金币+3): ★有帮助 2012-03-07 12:16:53
蛋白浓度100mg/mL，酸溶肽竟然达到了120mL/mL，两个单位不统一呀，另外我个人觉得是否实验误差，按照质量守恒定律，不可能质量突然增加的，浓度增加了是否没有计算酶蛋白量呀。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

sun880806
2楼2012-03-06 09:07:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好
请问楼主是怎么测定酶解肽的浓度的？可以交流一下吗？
赞一下(1人) 回复此楼
人生的三大悲剧：不知道选择，不坚持选择，不断选择！
5楼2012-03-07 15:14:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun880806

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 396101466 at 2012-03-07 15:14:22:
请问楼主是怎么测定酶解肽的浓度的？可以交流一下吗？

您好，我的测定方法如下:
取5mL酶解液，加5mL l5％(w/w)的三氯乙酸(TCA)溶液，混匀后静置10min，3500r/min离心10min，上清稀释至多肽浓度为1～10 mg/mL，取稀释液3mL加入2mL双缩脲试剂，混匀后静置20min。参比液以3mL蒸馏水和2mL双缩脲组成。在分光光度计可见光540nm处测定吸光值，查找标准曲线即可得酸溶肽含量 (mg/mL)
欢迎给出意见
赞一下(1人) 回复此楼
小硕
6楼2012-03-09 15:04:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好
引用回帖:
6楼: Originally posted by sun880806 at 2012-03-09 15:04:32:
您好，我的测定方法如下:
取5mL酶解液，加5mL l5％(w/w)的三氯乙酸(TCA)溶液，混匀后静置10min，3500r/min离心10min，上清稀释至多肽浓度为1～10 mg/mL，取稀释液3mL加入2mL双缩脲试剂，混匀后静置20min。参比液 ...

谢谢啦！领教了.......
赞一下(1人) 回复此楼
人生的三大悲剧：不知道选择，不坚持选择，不断选择！
7楼2012-03-10 10:20:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liun119

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sun880806 at 2012-03-06 16:17:07:
多谢了，酸溶肽是120mg/mL，不好意思，帖子中写错了；刚开始我也怀疑是误差，可不止一个样品出现这种情况。我确实没计算酶蛋白的量，这点非常感谢您的提醒。不过，我考虑，这种情况跟标准品有没有关系呀，我用的 ...

有理，不了解。 但是可以把标准做个全扫，样品也做个全扫，一般都会有不一波长下的峰的。 选两个不同波长都出峰的，做个定量， 看看结果是不是一样， 就知道540处是不是有更小的基团对它有影响了吧？
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2012-03-10 23:20:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xifu521

新虫 (初入文坛)
★ ★
树树8013: 金币+2, 谢谢新虫友解答交流，欢迎常来。 2012-03-29 18:54:33
楼主 建议你加测一个项 pH值，因为双缩脲反应时需要在碱性条件下进行的，3ml酸提液加2ml双缩脲试剂，pH值不一定会是碱性，只是猜测。
我的方法是1ml酸提液加4ml双缩脲试剂。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2012-03-22 14:38:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宋某

铜虫 (初入文坛)
★
sweety: 金币+1, 鼓励新虫发帖 2012-04-20 10:35:36
请教一下楼主，这个测定方法具体叫什么方法，和测定蛋白酶活力时的福林法有点相似，正如楼上所说，应该用碳酸钠做稀释液吧。
赞一下(1人) 回复此楼
Iamaslowwalker,butIneverwalkbackwards.
10楼2012-04-20 10:03:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

sun880806

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by 留级生2005 at 2012-03-06 09:07:52:
蛋白浓度100mg/mL，酸溶肽竟然达到了120mL/mL，两个单位不统一呀，另外我个人觉得是否实验误差，按照质量守恒定律，不可能质量突然增加的，浓度增加了是否没有计算酶蛋白量呀。

多谢了，酸溶肽是120mg/mL，不好意思，帖子中写错了；刚开始我也怀疑是误差，可不止一个样品出现这种情况。我确实没计算酶蛋白的量，这点非常感谢您的提醒。不过，我考虑，这种情况跟标准品有没有关系呀，我用的标准品是谷胱甘肽，而酶解产物是分子量更小的肽，酶解暴露出更多与显色剂发生反应的基团，导致吸光度增加；因此，根据谷胱甘肽显色反应得到的标准曲线计算得来的肽含量会比较高，而不是真正的质量增加。说的比较乱，您觉得我说的有没有道理呀？
赞一下 回复此楼
小硕
3楼2012-03-06 16:17:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sun880806 at 2012-03-06 16:17:07:
多谢了，酸溶肽是120mg/mL，不好意思，帖子中写错了；刚开始我也怀疑是误差，可不止一个样品出现这种情况。我确实没计算酶蛋白的量，这点非常感谢您的提醒。不过，我考虑，这种情况跟标准品有没有关系呀，我用的 ...

分析的不错，挺好的。
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-07 09:07:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sun880806 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +6 scalable 2026-08-24 6/300 2026-08-24 20:28 by 苦寒来香
[基金申请] 我面上完蛋了 +9 且听虎啸 2026-08-20 10/500 2026-08-24 20:08 by 苦寒来香
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭