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sun880806

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白酶解后 得到的肽 比蛋白还多 求高人解释一下

本人 用碱性蛋白酶 酶解蛋白,蛋白浓度100mg/mL,酶解后用三氯乙酸法测酸溶肽,标准物质选的是谷胱甘肽,测得的酸溶肽竟然达到了120mL/mL,我不知道这样的结果是不是合理,恳请高人帮忙解释一下
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小硕
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396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好

请问楼主是怎么测定酶解肽的浓度的?可以交流一下吗?
人生的三大悲剧:不知道选择,不坚持选择,不断选择!
5楼2012-03-07 15:14:22
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sun880806(金币+3): 有帮助 2012-03-07 12:16:53
蛋白浓度100mg/mL,酸溶肽竟然达到了120mL/mL,两个单位不统一呀,另外我个人觉得是否实验误差,按照质量守恒定律,不可能质量突然增加的,浓度增加了是否没有计算酶蛋白量呀。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-03-06 09:07:52
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sun880806

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by 留级生2005 at 2012-03-06 09:07:52:
蛋白浓度100mg/mL,酸溶肽竟然达到了120mL/mL,两个单位不统一呀,另外我个人觉得是否实验误差,按照质量守恒定律,不可能质量突然增加的,浓度增加了是否没有计算酶蛋白量呀。

多谢了,酸溶肽是120mg/mL,不好意思,帖子中写错了;刚开始我也怀疑是误差,可不止一个样品出现这种情况。我确实没计算酶蛋白的量,这点非常感谢您的提醒。不过,我考虑,这种情况跟标准品有没有关系呀,我用的标准品是谷胱甘肽,而酶解产物是分子量更小的肽,酶解暴露出更多与显色剂发生反应的基团,导致吸光度增加;因此,根据谷胱甘肽显色反应得到的标准曲线计算得来的肽含量会比较高,而不是真正的质量增加。说的比较乱,您觉得我说的有没有道理呀?
小硕
3楼2012-03-06 16:17:07
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sun880806 at 2012-03-06 16:17:07:
多谢了,酸溶肽是120mg/mL,不好意思,帖子中写错了;刚开始我也怀疑是误差,可不止一个样品出现这种情况。我确实没计算酶蛋白的量,这点非常感谢您的提醒。不过,我考虑,这种情况跟标准品有没有关系呀,我用的 ...

分析的不错,挺好的。
4楼2012-03-07 09:07:40
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