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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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qnqfv

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳、酶切的问题,谢谢各位大虾

请问:我的PCR跑出的基因,有一个位置不对。。但是酶切的结果却和另外的一样,怎么回事啊?

PCR



酶切
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lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR假阳性很多,酶切相对精确,但测序是金标准。可以测一下看看
我不管你看起看不起我,我都是个演员
8楼2012-01-12 08:21:10
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

第一个图没有marker,不好说。
2楼2012-01-10 22:41:20
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小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很有可能是你PCR不大对的那个引物,与载体质粒基因组有较高的同源性,PCR引物识别位点错了,然后就错P了。而酶切一样的话,说明是单一酶切位点,目的基因没有问题,是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因组做一个同源分析或者BLAST一下,应该很快能找出问题的,祝你实验顺利。
3楼2012-01-11 08:26:56
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qnqfv

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 小丹木木 at 2012-01-11 08:26:56:
很有可能是你PCR不大对的那个引物,与载体质粒基因组有较高的同源性,PCR引物识别位点错了,然后就错P了。而酶切一样的话,说明是单一酶切位点,目的基因没有问题,是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因 ...

非常感谢
4楼2012-01-11 17:02:18
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