应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电泳、酶切的问题，谢谢各位大虾
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 1732  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qnqfv

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳、酶切的问题，谢谢各位大虾

请问：我的PCR跑出的基因，有一个位置不对。。但是酶切的结果却和另外的一样，怎么回事啊？

PCR



酶切
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-01-10 17:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
第一个图没有marker，不好说。
赞一下 回复此楼
2楼2012-01-10 22:41:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很有可能是你PCR不大对的那个引物，与载体质粒基因组有较高的同源性，PCR引物识别位点错了，然后就错P了。而酶切一样的话，说明是单一酶切位点，目的基因没有问题，是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因组做一个同源分析或者BLAST一下，应该很快能找出问题的，祝你实验顺利。
赞一下 回复此楼
3楼2012-01-11 08:26:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qnqfv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 小丹木木 at 2012-01-11 08:26:56:
很有可能是你PCR不大对的那个引物，与载体质粒基因组有较高的同源性，PCR引物识别位点错了，然后就错P了。而酶切一样的话，说明是单一酶切位点，目的基因没有问题，是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因 ...

非常感谢
回复此楼
4楼2012-01-11 17:02:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qnqfv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-01-10 22:41:20:
第一个图没有marker，不好说。

啊，没有贴上来
回复此楼
5楼2012-01-11 17:03:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐的小傻瓜

木虫 (著名写手)

女神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一个图是质粒么？相同质粒处于不同构型时电泳图谱不同，超螺旋、环、线
赞一下 回复此楼
怀一颗宽容的心去生活，再拥挤的世界也变得无限宽广，再平凡的人生也变得充满阳光。
6楼2012-01-11 17:33:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guojianping

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR很可能P错地方的，酶切验证为准的，叫做严格验证，了不起测序去。以后贴图最起码写清楚哪个是哪个，这样叫别人猜的话很多人懒得看的
赞一下 回复此楼
7楼2012-01-11 20:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR假阳性很多，酶切相对精确，但测序是金标准。可以测一下看看
赞一下 回复此楼
我不管你看起看不起我，我都是个演员
8楼2012-01-12 08:21:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyhl

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一个图有可能是电泳的问题，即使你做了酶切，我觉得还是必须要测序才能确认你的PCR产物是否真正是你的目的基因，以及目的基因是否正确。
赞一下 回复此楼
9楼2012-01-12 10:18:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qnqfv 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕283求调剂 +14 试试看呗 2026-04-04 15/750 2026-04-05 19:21 by jkddd
[考研] 计算机11408，286分求调剂 +7 木子念晞 2026-04-05 7/350 2026-04-05 19:02 by chy09050039
[考研] 284求调剂 +7 徐同学_001 2026-04-04 13/650 2026-04-05 17:19 by yulian1987
[考研] 材料专硕 调剂 +14 CXN123456 2026-04-03 14/700 2026-04-05 17:18 by Hdyxbekcb
[考研] 男生，一志愿沪9生物学071000，初试308求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:26 by barlinike
[考研] 一志愿郑州大学材料与化工085600，求调剂 +24 吃的不少 2026-04-02 24/1200 2026-04-04 23:20 by 永字号
[考研] 296材料专硕求调剂 +21 202451007219 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 21:48 by hemengdong
[考研] 一志愿沪9，求生物学调剂，326分 +6 刘墨墨 2026-04-04 6/300 2026-04-04 19:44 by 唐沐儿
[考研] 333求调剂 +9 阿科逸 2026-03-31 9/450 2026-04-04 18:25 by macy2011
[考研] 怎么删帖子啊 +3 缝曦1000 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:20 by 土木硕士招生
[考研] 295求调剂 +3 尚偌呀 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:23 by zhq0425
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
[基金申请] 请问共同通讯和共同一作的认可度问题 10+4 psa1234 2026-04-01 10/500 2026-04-03 11:08 by Kittylucky
[考研] 312 化工或制药调剂 +8 小小墨123 2026-04-02 9/450 2026-04-03 09:12 by zhouxiaoyu
[考研] 【求调剂】新能源材料本科，一志愿211，初试321 +6 求调剂学校， 2026-04-02 6/300 2026-04-02 09:41 by 晴空210210
[考研] 304求调剂 +12 素年祭语 2026-03-31 15/750 2026-04-01 22:41 by peike
[考研] 310分求调剂 +4 成功上岸wang 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:35 by liu823948201
[考研] 311求调剂 +10 李芷新1 2026-03-31 10/500 2026-04-01 14:38 by chenqifeng666
[考研] 326求调剂 +4 崽崽仔 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:58 by 我的船我的海
[考研] 考研材料工程351分调剂 +5 整个好的 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:36 by topgun2009
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭