应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电泳、酶切的问题，谢谢各位大虾
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
91/1返回列表
查看: 1459  |  回复: 8
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qnqfv

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳、酶切的问题，谢谢各位大虾

请问：我的PCR跑出的基因，有一个位置不对。。但是酶切的结果却和另外的一样，怎么回事啊？

PCR



酶切
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-01-10 17:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
第一个图没有marker，不好说。
赞一下 回复此楼
2楼2012-01-10 22:41:20
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很有可能是你PCR不大对的那个引物，与载体质粒基因组有较高的同源性，PCR引物识别位点错了，然后就错P了。而酶切一样的话，说明是单一酶切位点，目的基因没有问题，是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因组做一个同源分析或者BLAST一下，应该很快能找出问题的，祝你实验顺利。
赞一下 回复此楼
3楼2012-01-11 08:26:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qnqfv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 小丹木木 at 2012-01-11 08:26:56:
很有可能是你PCR不大对的那个引物，与载体质粒基因组有较高的同源性，PCR引物识别位点错了，然后就错P了。而酶切一样的话，说明是单一酶切位点，目的基因没有问题，是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因 ...

非常感谢
回复此楼
4楼2012-01-11 17:02:18
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qnqfv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-01-10 22:41:20:
第一个图没有marker，不好说。

啊，没有贴上来
回复此楼
5楼2012-01-11 17:03:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐的小傻瓜

木虫 (著名写手)

女神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一个图是质粒么？相同质粒处于不同构型时电泳图谱不同，超螺旋、环、线
赞一下 回复此楼
怀一颗宽容的心去生活，再拥挤的世界也变得无限宽广，再平凡的人生也变得充满阳光。
6楼2012-01-11 17:33:46
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guojianping

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR很可能P错地方的，酶切验证为准的，叫做严格验证，了不起测序去。以后贴图最起码写清楚哪个是哪个，这样叫别人猜的话很多人懒得看的
赞一下 回复此楼
7楼2012-01-11 20:43:26
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR假阳性很多，酶切相对精确，但测序是金标准。可以测一下看看
赞一下 回复此楼
我不管你看起看不起我，我都是个演员
8楼2012-01-12 08:21:10
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyhl

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一个图有可能是电泳的问题，即使你做了酶切，我觉得还是必须要测序才能确认你的PCR产物是否真正是你的目的基因，以及目的基因是否正确。
赞一下 回复此楼
9楼2012-01-12 10:18:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qnqfv 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭