应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电泳、酶切的问题，谢谢各位大虾
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 1731  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qnqfv

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳、酶切的问题，谢谢各位大虾

请问：我的PCR跑出的基因，有一个位置不对。。但是酶切的结果却和另外的一样，怎么回事啊？

PCR



酶切
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-01-10 17:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
第一个图没有marker，不好说。
赞一下 回复此楼
2楼2012-01-10 22:41:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很有可能是你PCR不大对的那个引物，与载体质粒基因组有较高的同源性，PCR引物识别位点错了，然后就错P了。而酶切一样的话，说明是单一酶切位点，目的基因没有问题，是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因组做一个同源分析或者BLAST一下，应该很快能找出问题的，祝你实验顺利。
赞一下 回复此楼
3楼2012-01-11 08:26:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qnqfv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 小丹木木 at 2012-01-11 08:26:56:
很有可能是你PCR不大对的那个引物，与载体质粒基因组有较高的同源性，PCR引物识别位点错了，然后就错P了。而酶切一样的话，说明是单一酶切位点，目的基因没有问题，是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因 ...

非常感谢
回复此楼
4楼2012-01-11 17:02:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qnqfv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-01-10 22:41:20:
第一个图没有marker，不好说。

啊，没有贴上来
回复此楼
5楼2012-01-11 17:03:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐的小傻瓜

木虫 (著名写手)

女神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一个图是质粒么？相同质粒处于不同构型时电泳图谱不同，超螺旋、环、线
赞一下 回复此楼
怀一颗宽容的心去生活，再拥挤的世界也变得无限宽广，再平凡的人生也变得充满阳光。
6楼2012-01-11 17:33:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guojianping

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR很可能P错地方的，酶切验证为准的，叫做严格验证，了不起测序去。以后贴图最起码写清楚哪个是哪个，这样叫别人猜的话很多人懒得看的
赞一下 回复此楼
7楼2012-01-11 20:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR假阳性很多，酶切相对精确，但测序是金标准。可以测一下看看
赞一下 回复此楼
我不管你看起看不起我，我都是个演员
8楼2012-01-12 08:21:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyhl

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一个图有可能是电泳的问题，即使你做了酶切，我觉得还是必须要测序才能确认你的PCR产物是否真正是你的目的基因，以及目的基因是否正确。
赞一下 回复此楼
9楼2012-01-12 10:18:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qnqfv 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿河北工业大学材料工程，初试344求专硕调剂 +3 15933906766 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:17 by dongzh2009
[考研] 数一英一 347 人工智能国奖论文都有求调剂 +3 乌拉儿山脉 2026-03-30 7/350 2026-04-05 10:32 by zhq0425
[考研] 298求调剂 +7 manman511 2026-04-05 7/350 2026-04-05 10:29 by 唐沐儿
[考研] 一志愿北京化工大学，初试成绩350求调剂 +9 沿岸?贝壳 2026-04-04 14/700 2026-04-05 01:09 by 沿岸?贝壳
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 23:10 by 无际的草原
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +11 努力奋斗112 2026-04-04 11/550 2026-04-04 20:51 by 蓝云思雨
[考研] 297求调剂 +11 ljy20040718！ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 09:23 by 来看流星雨10
[考研] 材料295 +13 小英11 2026-04-03 14/700 2026-04-04 09:02 by 来看流星雨10
[考研] 总分328生物与医药考数学求调剂 +7 aaadim 2026-04-02 9/450 2026-04-03 22:53 by syh9288
[考研] 化工调剂303分，过四级 +28 栖梧待风 2026-04-02 28/1400 2026-04-03 21:40 by qlm5820
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
[考研] 274求调剂 +9 顺理成张 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:10 by 啊俊！
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
[考研] 316求调剂 +14 舟自梗 2026-04-01 18/900 2026-04-03 10:28 by linyelide
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突， 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:16 by 兔突突突，
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业 +6 what张 2026-04-01 7/350 2026-04-02 16:48 by zzsw+
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 生物与医药考研调剂 +5 铁憨憨123425 2026-03-31 5/250 2026-04-01 18:01 by syh9288
[考研] 339求调剂 +5 zjjkt 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:18 by JourneyLucky
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭