24小时热门版块排行榜    

查看: 1690  |  回复: 8

qnqfv

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳、酶切的问题,谢谢各位大虾

请问:我的PCR跑出的基因,有一个位置不对。。但是酶切的结果却和另外的一样,怎么回事啊?

PCR



酶切
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

第一个图没有marker,不好说。
2楼2012-01-10 22:41:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很有可能是你PCR不大对的那个引物,与载体质粒基因组有较高的同源性,PCR引物识别位点错了,然后就错P了。而酶切一样的话,说明是单一酶切位点,目的基因没有问题,是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因组做一个同源分析或者BLAST一下,应该很快能找出问题的,祝你实验顺利。
3楼2012-01-11 08:26:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qnqfv

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 小丹木木 at 2012-01-11 08:26:56:
很有可能是你PCR不大对的那个引物,与载体质粒基因组有较高的同源性,PCR引物识别位点错了,然后就错P了。而酶切一样的话,说明是单一酶切位点,目的基因没有问题,是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因 ...

非常感谢
4楼2012-01-11 17:02:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qnqfv

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2012-01-10 22:41:20:
第一个图没有marker,不好说。

啊,没有贴上来
5楼2012-01-11 17:03:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐的小傻瓜

木虫 (著名写手)

女神

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一个图是质粒么?相同质粒处于不同构型时电泳图谱不同,超螺旋、环、线
怀一颗宽容的心去生活,再拥挤的世界也变得无限宽广,再平凡的人生也变得充满阳光。
6楼2012-01-11 17:33:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guojianping

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR很可能P错地方的,酶切验证为准的,叫做严格验证,了不起测序去。以后贴图最起码写清楚哪个是哪个,这样叫别人猜的话很多人懒得看的
7楼2012-01-11 20:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR假阳性很多,酶切相对精确,但测序是金标准。可以测一下看看
我不管你看起看不起我,我都是个演员
8楼2012-01-12 08:21:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyhl

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一个图有可能是电泳的问题,即使你做了酶切,我觉得还是必须要测序才能确认你的PCR产物是否真正是你的目的基因,以及目的基因是否正确。
9楼2012-01-12 10:18:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qnqfv 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 070300化学319求调剂 +3 锦鲤0909 2026-03-17 3/150 2026-03-17 15:01 by 我的船我的海
[考研] 材料专硕306英一数二 +6 z1z2z3879 2026-03-16 8/400 2026-03-17 14:03 by 勇敢太监王公公
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +3 share_joy 2026-03-16 3/150 2026-03-17 13:41 by houyaoxu
[考博] 26申博 +4 八旬速览 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +6 SUICHILD 2026-03-12 6/300 2026-03-17 09:24 by 雾散后相遇lc
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 一志愿华中师范071000,325求调剂 +6 RuitingC 2026-03-12 6/300 2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见