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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电泳、酶切的问题，谢谢各位大虾
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qnqfv

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳、酶切的问题，谢谢各位大虾

请问：我的PCR跑出的基因，有一个位置不对。。但是酶切的结果却和另外的一样，怎么回事啊？

PCR



酶切
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1楼2012-01-10 17:27:29
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qnqfv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 小丹木木 at 2012-01-11 08:26:56:
很有可能是你PCR不大对的那个引物，与载体质粒基因组有较高的同源性，PCR引物识别位点错了，然后就错P了。而酶切一样的话，说明是单一酶切位点，目的基因没有问题，是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因 ...

非常感谢
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4楼2012-01-11 17:02:18
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
第一个图没有marker，不好说。
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2楼2012-01-10 22:41:20
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小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很有可能是你PCR不大对的那个引物，与载体质粒基因组有较高的同源性，PCR引物识别位点错了，然后就错P了。而酶切一样的话，说明是单一酶切位点，目的基因没有问题，是PCR引物的问题。
你可以把引物和载体质粒基因组做一个同源分析或者BLAST一下，应该很快能找出问题的，祝你实验顺利。
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3楼2012-01-11 08:26:56
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qnqfv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-01-10 22:41:20:
第一个图没有marker，不好说。

啊，没有贴上来
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5楼2012-01-11 17:03:03
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