应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 细菌脂肪酶活性的测定
51/1返回列表
查看: 4396  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

[求助] 细菌脂肪酶活性的测定

大家好：我想在这跟大家讨论一下脂肪酶活性的测定方法。我是以聚乙烯醇橄榄油乳化液为底物，（2g聚乙烯醇，150ml水，加热溶解，加入50ml橄榄油。用组织搅拌机，匀浆两分钟）粗酶液，用的就是细菌的菌悬液！测定过程：取5ml PH=7.5的磷酸缓冲液5ml，分别到4个锥形瓶中！在40℃预热5min 加入2ml菌悬液，40℃保温15分钟，取出后，加入15ml95%乙醇做终止剂。其中两个空白以失活的酶加入！其他条件都一样！为什么我用0.05mol/L的OHNa滴定，发现消耗的碱量很少，且跟空白差不多！我不知道问题在哪？我的方法哪有不对吗？请各位指教。谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
只要努力，总会有结果的
1楼 2012-01-07 10:53:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秦川萝卜头

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 李庆张雪 at 2013-11-06 00:17:48
亲，我用pnpb法在做蛙的消化道脂肪酶活力，可是结果一直不好，想改用聚乙烯醇橄榄油乳化液来测，请问乳化液怎么制作呀，还有有没有改进的pnpb法呀，跪求哈

微生物实验书上就有橄榄油乳化法的具体操作，这个也有个国标，最好按国标来，Pnpb的改进法，不是太清楚
赞一下 回复此楼
只要努力，总会有结果的
10楼2013-11-06 22:34:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2012-01-08 23:44:51
按你这样说就是酶没反应吧，你用菌悬液，怎么不破碎细胞呢，这个脂肪酶表达不一定是胞外分泌的，采用脂肪酶标准滴定法，应该采用的是粗酶液（细胞破碎液）。还有一种可能就是你的酶活性很低或没活性。
赞一下(1人) 回复此楼
人生百态原为海，看破红尘方为岸！
2楼2012-01-08 22:10:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秦川萝卜头

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-01-08 22:10:38:
按你这样说就是酶没反应吧，你用菌悬液，怎么不破碎细胞呢，这个脂肪酶表达不一定是胞外分泌的，采用脂肪酶标准滴定法，应该采用的是粗酶液（细胞破碎液）。还有一种可能就是你的酶活性很低或没活性。

您好，如果要破碎细胞，应该怎么做呢？我还想请教一下您，P-NPP法测脂肪酶活性应该怎么做！关键是我的P-NPP不溶，不知如何是好！恳请您的解答！谢谢！
赞一下 回复此楼
只要努力，总会有结果的
3楼2012-01-08 22:17:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 大力鼓励交流^_^ 2012-01-12 11:07:28
秦川萝卜头(金币+5): 2012-01-12 14:22:40
细胞破碎采用的是超声波破碎仪，要是没有细胞破碎仪的话，你可以采用反复冻融法破碎，后者的效果不是很好。或者采用溶菌酶也行。我们采用pNP系列底物测定酶活，采用紫外分光光度计动力学曲线连续扫描来测定酶促反应斜率。pNP底物采用乙腈溶解，配成10mM浓度就行，然后直接加到反应体系中就可以了。
赞一下(1人) 回复此楼
人生百态原为海，看破红尘方为岸！
4楼2012-01-09 15:54:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qs8kylt1wr 2026-05-01 4/200 2026-05-03 07:19 by jmr1kibhvw
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qs8kylt1wr 2026-05-01 4/200 2026-05-03 06:52 by jmr1kibhvw
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-03 05:52 by w5idbsc3mz
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 05:49 by w5idbsc3mz
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 04:34 by w5idbsc3mz
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 04:19 by w5idbsc3mz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 03:51 by w5idbsc3mz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 03:19 by w5idbsc3mz
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 02:06 by w5idbsc3mz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 k17zww5nna 2026-05-01 5/250 2026-05-03 02:04 by w5idbsc3mz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 01:34 by w5idbsc3mz
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qs8kylt1wr 2026-05-01 4/200 2026-05-03 00:00 by 火炎焱燚炙烤
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:51 by zahslv263y
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:36 by zahslv263y
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-02 14:21 by zahslv263y
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 5/250 2026-05-02 09:21 by dz7y1p1i98
[论文投稿] 一篇MDPI论文改变了学习工作和生活 +3 helsinglee 2026-04-29 4/200 2026-05-01 11:45 by bobvan
[有机交流] 一个化合物的合成路线：CAS:367929-02-0 名称：8β-乙烯基雌二醇 50+4 zhquanbing 2026-04-28 4/200 2026-04-30 22:45 by zyqchem
[考博] 中国地质大学（北京）博士招生补录，数理学院材料科学与工程专业和材料与化工专业 +3 liuxh329 2026-04-29 3/150 2026-04-30 15:42 by 顺利毕业zs
[基金申请] 收到国自然专家邀请后几年才会有本子送过来评 +3 barley5 2026-04-30 3/150 2026-04-30 14:58 by aspect3000
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭