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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 测酶活性时总蛋白的测定
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浏阳河畔

铁虫 (小有名气)

[求助] 测酶活性时总蛋白的测定

我用南京建成的试剂盒测SOD，POD等，需要测粗酶液的总蛋白，用考马斯亮蓝法，但只能测ug/ml数量级的，而试剂盒说明书要求用mg/ml算，这样误差会不会太大？
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天行健君子以自强不息
1楼 2013-03-22 22:40:25
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-23 08:18:38
粗酶液的总蛋白浓度一般是mg/ml级别的。考马斯亮蓝法测蛋白的浓度是μg/ml，你把样品稀释倍数换算回去后，得到的原液蛋白浓度就是mg/ml数量级了。
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2楼2013-03-23 05:29:51
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普通回帖

wizardfan

至尊木虫 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
浏阳河畔: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-23 10:20:37
微克的精度高，换算低精度的毫克没有问题的
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3楼2013-03-23 08:19:17
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浏阳河畔

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wizardfan at 2013-03-23 08:19:17
微克的精度高，换算低精度的毫克没有问题的

是的  呵呵 另外我还有一个如何设置重复的问题，是应该每个处理都从头开始做三次重复，还是只提取一次，重复测定三次呢？
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天行健君子以自强不息
4楼2013-03-23 10:23:10
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浏阳河畔

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-23 05:29:51
粗酶液的总蛋白浓度一般是mg/ml级别的。考马斯亮蓝法测蛋白的浓度是μg/ml，你把样品稀释倍数换算回去后，得到的原液蛋白浓度就是mg/ml数量级了。

谢谢
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天行健君子以自强不息
5楼2013-03-23 10:24:03
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wizardfan

至尊木虫 (著名写手)

优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by 浏阳河畔 at 2013-03-23 10:23:10
是的  呵呵 另外我还有一个如何设置重复的问题，是应该每个处理都从头开始做三次重复，还是只提取一次，重复测定三次呢？...

这个取决于你的实验目的，只是做探讨实验的话，提取一次测三次就可以了
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6楼2013-03-24 08:24:07
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浏阳河畔

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wizardfan at 2013-03-24 08:24:07
这个取决于你的实验目的，只是做探讨实验的话，提取一次测三次就可以了...

我是想要比较不同处理之间是否有差异的，应该怎么设重复呢？
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天行健君子以自强不息
7楼2013-03-24 11:25:55
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wizardfan

至尊木虫 (著名写手)

优秀版主
不同处理 分别做重复
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8楼2013-03-25 09:02:47
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ivyvampire

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wizardfan at 2013-03-25 09:02:47
不同处理 分别做重复

正解
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9楼2013-03-25 09:17:59
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浏阳河畔

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wizardfan at 2013-03-25 09:02:47
不同处理 分别做重复

每一个“分别做的重复”要不要再重复测3次呢？
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天行健君子以自强不息
10楼2013-03-25 18:49:45
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