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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 细菌生长曲线的测定
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

[求助] 细菌生长曲线的测定

各位大侠，我在测细菌生长曲线时用紫外扫描波长时发现扫描的图有点奇怪，只有波长在290多有个很小的吸收峰，而且紧挨着这个峰的左边的线看起来很粗，且波动大，不知道是什么原因？请大侠指教！我的参比液用的是没加细菌的细菌活化培养液。在网上看吸收波长都设在600，课本上写的波长设在420.我觉得这波长应看细菌而定吧？
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只要努力，总会有结果的
1楼2011-09-27 23:16:19
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
rainwander(金币+3, MicEPI+1): 鼓励交流 2011-09-28 10:40:24
290的吸收峰应该是培养基中溶解的蛋白质造成的。你用紫外扫描到那个波长呢，大于340就是可见光，不是紫外的范畴。

而且一般细菌都是600nm，这个波长严格说，是浊度，而不是光学意义上的吸收。

一般新配置的培养基，在600nm吸收很小，即使有肉眼可见的淡黄色，在600nm也没有多大读数，只有细菌长起来后才会有吸收。

一般指OD，是光密度的英文简写optical density
而吸收A，是指的absorbance。
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微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
2楼2011-09-28 08:55:26
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bohr86

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-09-28 10:40:30
这个确实和细菌种类有关，420、560、600nm都有人做过～所以需要找一个含有大量菌的培养基一空白培养基进行对照，找做大吸收峰～ 你那种情况，建议多做几次看还有没有其他的误差没考虑到～
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3楼2011-09-28 09:27:24
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-09-28 08:55:26:
290的吸收峰应该是培养基中溶解的蛋白质造成的。你用紫外扫描到那个波长呢，大于340就是可见光，不是紫外的范畴。

而且一般细菌都是600nm，这个波长严格说，是浊度，而不是光学意义上的吸收。

一般新配置的 ...

对，文献中说的就是OD值，OD值跟吸光度不一样吗？请大侠指教。万分感谢
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只要努力，总会有结果的
4楼2011-09-28 13:15:05
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-09-28 08:55:26:
290的吸收峰应该是培养基中溶解的蛋白质造成的。你用紫外扫描到那个波长呢，大于340就是可见光，不是紫外的范畴。

而且一般细菌都是600nm，这个波长严格说，是浊度，而不是光学意义上的吸收。

一般新配置的 ...

还有，测OD时扫描波长是不是就是扫他测吸光度的波长啊？
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只要努力，总会有结果的
5楼2011-09-28 13:31:57
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kcb331202273

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5): 鼓励新虫~~~ 2011-09-28 23:58:10
个人认为，不可单纯的通过扫描确定波长，因为吸收峰值跟培养基有很大关系，排除培养基的影响，菌体的吸收峰值在波长为600nm时较高。
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旁观者的姓名永远不会出现在比赛的记分牌上。
6楼2011-09-28 15:56:17
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by kcb331202273 at 2011-09-28 15:56:17:
个人认为，不可单纯的通过扫描确定波长，因为吸收峰值跟培养基有很大关系，排除培养基的影响，菌体的吸收峰值在波长为600nm时较高。

那意思是我不用扫描了？直接在波长为600处测就行？OD值跟吸光度值应该一样吧，只是在不同领域两个不同的叫法吧？
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只要努力，总会有结果的
7楼2011-09-28 23:25:32
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by kcb331202273 at 2011-09-28 15:56:17:
个人认为，不可单纯的通过扫描确定波长，因为吸收峰值跟培养基有很大关系，排除培养基的影响，菌体的吸收峰值在波长为600nm时较高。

我扫描时空白用的就是不加细菌的培养基啊，应该也排除了培养基的影响啊
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只要努力，总会有结果的
8楼2011-09-28 23:28:18
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kcb331202273

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

秦川萝卜头(金币+5): 2011-10-08 19:05:34
引用回帖:
8楼: Originally posted by 秦川萝卜头 at 2011-09-28 23:28:18:
我扫描时空白用的就是不加细菌的培养基啊，应该也排除了培养基的影响啊

你时在可见光范围内扫描，扫描一个空白培养基，再扫描带菌的培养基，然后将两者对比，找出带菌培养基明显不同于空白培养基的最高吸收峰。
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旁观者的姓名永远不会出现在比赛的记分牌上。
9楼2011-09-29 09:01:22
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by kcb331202273 at 2011-09-29 09:01:22:
你时在可见光范围内扫描，扫描一个空白培养基，再扫描带菌的培养基，然后将两者对比，找出带菌培养基明显不同于空白培养基的最高吸收峰。

为什么我扫描出来的图是这样？
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只要努力，总会有结果的
10楼2011-09-29 16:19:21
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